A Aula Prática Hemaglutinação

[pic 1]

FACULDADE PITÁGORAS

HEMAGLUTINAÇÃO

BETIM

2016

---

FACULDADE PITÁGORAS

Cleudinice rodrigues

Daniela da Silva

Edwirges de Paula Silva

Henrique Alves

Juliana Pereira

Luana Lopes

Pâmela Steffani Santos

Renata Belicia Guimaraes

Yhara janaina

HEMAGLUTINAÇÃO

Relatório referente a aula prática da disciplina de Fisiopatologia e Farmacoterapia III, como requisito de avaliação parcial do 2°Bimestre do 7° Período da graduação em Farmácia na Faculdade Pitágoras.

Orientador: Prof. Murilo Resende

BETIM

2016

SUMÁRIO

1.        Introdução        4

2.        Objetivo do método         4

3.        Materiais e reagentes        4

4.        Descrição do procedimento        5

5.        Montagem da prácica        5

6.        Resultado        7

7.   Conclusão        7

8.   Anexos        8

9.        Referências bibliográficas        9

---

1. INTRODUÇÃO

A reação de hemaglutinação é uma técnica para a detecção de anticorpos específicos que, quando presentes, reconhecerão antígenos na superfície de eritrócitos, causando aglutinação, devido a interação com determinados vírus.

Os vírus capazes de causar a aglutinação de hemácias são chamados hemaglutinantes e o que confere a eles essa característica é a presença da Glicoproteína Hemaglutinina na superfície da partícula viral.

Para a realização da reação de Hemaglutinação (HA) as hemácias em suspensão são colocadas em contato com uma suspensão de vírus. Se a concentração de vírus for suficientemente alta, haverá formação de múltiplas pontes entre eles e as hemácias, que se depositarão de forma difusa.  .

1. Objetivo do método

Realizar  pesquisa de hemaglutinação, e compreender seu significado clínico e a qualificação e quantificação da capacidade de um virus em causar hemaglutinaçao, além de determinar se há em um soro anticorpos que sejam capazes de inibir este processo.

1. Materiais e reagentes

• Luvas
• Máscaras
• Amostra Biológica (Soro)
• Anticorpo (anti-D)
• Placas de microcavidades
• Pipeta 50 µl azul
• Ponteira amarela

1. Descrição do procedimento

• Em duas placas de microcavidades, pipetou-se 50 microlitros de salina, onde a primeira placa foi preenchida nas cavidades A, B, C, D, a segunda nas cavidades E, F, G, H, e enumeradas de 1 a 12;

• Na sequência, pipetou-se 50 microlitros de sangue, identificados de A ao H, e colocou apenas na primeira microcavidade  de cada placa (A, B, C, D, E, F, G, H );

• Em seguida homogenizou-se as microcavidades, pegando 50 microlitros de uma e passando para a outra alternadamente ate que a numero 12 ficasse bem mais clara e com 100 microlitros;
• Pipetou-se 10 microlitros de anticorpo (anti-D) nas cavidades de 1 a 11;
• Em seguida, com a placa sobre a bancada, foi feito a homogeneização lentamente;
• Molhou-se papeis toalhas e colocou de repouso as placas de microcavidades sobre eles, para amenizar impactos
• Esperou-se em torno de 1:00 hora
• Observou-se houve  aglutinação nas placas.

1. Montagem da prática

[pic 2]

[pic 3]

A figura acima mostra como ficou a placa de microcavidades após a sua homogeneização (vista de lado)

[pic 4]

A figura acima mostra como ficou a placa de microcavidades após a sua homogeneização (vista de cima)

[pic 5]

A figura acima mostra as duas placas de microcavidades durante o processo de espera.

1. Resultado

REAGENTE [pic 6]

                               NÃO REAGENTE                  INDERTEMINADA[pic 7][pic 8]

[pic 9]

Observou-se na imagem acima a presença de hemaglutinação reagente, não reagente e inderteminada na mesma placa.