Prática De Construção De Curva De Calibração - Espectofotometria

               UNIVERSIDADE DO OESTE DE SANTA CATARINA

                              UNOESC – CAMPUS DE XANXERÊ

                                           Bruna Weschenfelder

                                             Eduarda Wassmuth

                                                Vitória Cantele

                       

            PRÁTICA DE CONSTRUÇÃO DE CURVA DE CALIBRAÇÃO -
                                      ESPECTOFOTOMETRIA

                                                                Xanxerê

2022

                                           Bruna Weschenfelder

                                             Eduarda Wassmuth

                                                Vitória Cantele

            PRÁTICA DE CONSTRUÇÃO DE CURVA DE CALIBRAÇÃO -
                                      ESPECTOFOTOMETRIA

Trabalho da Disciplina de Química Analítica Quali -Quantitativa, apresentado ao curso de farmácia, Área da saúde, Universidade do Oeste de Santa Catarina, campus I.

Professora: Jessica Tombini.

                                                   Xanxerê

                                                     2022

1. REFERENCIAL BIBLIOGRÁFICO

1.1 ESPECTOFOTOMETRIA:

Segundo Rosa (2013, p. 108), a espectrofotometria é o método de análise óptica mais usado nas investigações biológicas e físico-químicas, onde o espectrofotômetro é um instrumento que permite comparar a radiação absorvida ou transmitida por uma solução que contém uma quantidade desconhecida e uma quantidade conhecida de mesma substância. Esse método é baseado na medida da transmitância, T, ou da absorbância, A, de solução contida em uma célula transparente, onde a transmitância irá exprimir a fração da energia luminosa que consegue atravessar uma determinada espessura de um material, sem ser absorvida, sendo medida em porcentagem, e a absorbância irá exprimir a fração da energia luminosa que é absorvida por uma determinada espessura de um material, onde também pode ser medida em porcentagem. Podemos defini-las, respectivamente, como:

T=10-A  e  A=-log T

Se um feixe de luz branca passar através de uma cubeta de vidro cheia com um líquido, a radiação emergente será́ menos intensa que a incidente. A diminuição dessa intensidade pode ser aproximadamente igual em todo o intervalo de comprimento de onda ou pode apresentar diferentes amplitudes para diferentes cores. Essa perda ocorre devido à absorção da energia radiante pelo líquido. A absorção da luz é maior quanto mais concentrada for a solução que atravessa a cubeta e quanto maior for o caminho percorrido pelo feixe de luz através da amostra. Essas duas relações formarão a Lei de Beer-Bourguer-Lambert, mais conhecida como Lei de Beer. Esta lei irá relacionar absorbância (A), absortividade molar (ε) comprimento do percurso óptico, em cm (b) e concentração da espécie absorvente, em g/L (c), tendo:

A= ε.b.c

1.1.1 CURVA DE CALIBRAÇÃO:

Segundo Capello, quando feito uma análise, a preocupação com a sensibilidade do aparelho é fundamental para garantir a exatidão e a confiabilidade dos resultados. Para isso, é utilizado uma curva de calibração, que é um ajuste dos dados experimentais, na qual é relacionado o sinal observado no equipamento com a de certa quantidade de analito, ou seja, da substância analisada na amostra. A partir disto, foi utilizado esse conceito para determinar a concentração exata de um determinado composto, a partir da absorbância lida através de um espectrofotômetro. Para o ajuste, foi utilizado o método dos mínimos quadrados, para encontrar a melhor reta que passa através da região linear dos dados e assim identificar a equação de calibração do equipamento analítico, através dos coeficientes angular e linear. Também foi feita a regressão linear com a ajuda do Excel, caracterizando-o assim como uma ótima ferramenta para a resolução deste método numérico.

2. MATERIAL E MÉTODOS

Nessa seção serão descritos os materiais e métodos que foram utilizados para a realização da construção de curva de calibração.
Em nosso experimento o analito usado foi o KMnO4 (permanganato de potássio), um soluto que entrando em contato com o solvente que foi usado em nosso experimento, a água,  permite as diluições necessárias, uma vez que os permanganatos são substancias altamente coloridas, e assim é possível a realização da leitura por espectrofotometria que irá medir a quantidade de luz que é produzida ou absorvida por determinada solução, com a finalidade de identificar e determinar a concentração de substancias em um solvente.

2.1 Materiais:

• Balança analítica;
• Becker;
• Balão Volumétrico;
• Tubos de ensaio;
• Pisseta;
• Espectrofotômetro;
  

2.2 Métodos:

Inicialmente, foi feito o uso da balança analítica para pesar 0,087 g de KMnO4 que posteriormente foi colocado em um becker, e em seguida foi diluído em 100 mL de água. Assim que a solução estava pronta a mesma foi passada para um balão volumétrico e realizou-se a tríplice lavagem do becker para que não houvesse nenhum resquício desta solução no mesmo. Após, foram realizados cálculos para realizar a transferência o para os tubos de ensaio nas concentrações de 0,004M; 0,003M; 0,002M; e 0,001M. Para isso foi utilizada a formula de C1.V1=C2.V2, e chegou-se aos determinados resultados respectivamente:
8 mL da solução + 2 mL de água;
6 mL da solução + 4 mL de água;
4 mL da solução + 6 mL de água;
2 mL da solução + 8 mL de água;
Tendo os resultados dos cálculos em mãos foram distribuídos as quantidades da solução e água para cada tubo de ensaio, como pode ser visto na figura 1.