A Extração de DNA de mucosa bucal e teste de micronúcleo

Extração de DNA de mucosa bucal e teste de micronúcleo    29/04/2019

1. INTRODUÇÃO
2. MATERIAIS E MÉTODOS

Becker

Conta gotas

Microscópio

Lamina

Lamínula

Corante

Tubo de ensaio

Copo descartável

Espátula de madeira

Detergente

Sal

Gelo

Micropipeta

- EXTRAÇÃO DE DNA DE MUCOSA BUCAL

[pic 1] 

1° Higienizou-se a boca com água, fazendo bochechos.

[pic 2]  2° Raspou-se a mucosa bucal com uma espátula de madeira

[pic 3]  3° colocou-se água com açúcar na boca e bochechou por aproximadamente 30 segundos

[pic 4] 4° Recolheu-se a água com açúcar do bochecho e mergulhou a espátula usada na raspagem.

     [pic 5]           [pic 6]

5° Transferiu-se 5 ml do volume obtido do bochecho para um tubo de ensaio e foi adicionado uma pitada de sal no mesmo. Homogeinezando-o

[pic 7]        [pic 8]

6° Adicionou-se 500ul de detergente diluido e homogeneizou cuidadosamente

[pic 9]  7° Aqueceu-se por 10 minutos no banho maria

[pic 10]  8° Resfriou por 5 minutos

 

- OBSERVAÇÃO DE CÉLULAS DA MUCOSA BUCAL

[pic 11]  1° Raspo-se com um swab a parte interna da bochecha

[pic 12]  2° Fixou-se a lamina no alcool durante 2 minutos; Retirou-se o excesso de alcool e colocou-se no esfregaço uma gota de azul de metileno e esperou-se 2 minutos.

[pic 13]  3° Retirou-se o excesso de azul de metileno jogando água sobre a lâmina.

[pic 14] [pic 15]   

4° Colocou-se uma gota de água sobre a lâmina e cobriu com uma laminula cuidadosamente para que não ficassem bolhas.

1. RESULTADOS

[pic 16] DNA visível

[pic 17]

Células normais sem nenhuma alteração

1. CONCLUSÃO

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