Pcr Relatorio De Aula Pratica

RELATÓRIO DE ATIVIDADES PRÁTICAS : DETERMINAÇÃO DE PROTEÍNA C REATIVA (PCR)

O fundamento básico das técnicas de aglutinação é similar ao princípio das técnicas que se utilizam do conceito de precipitação. No entanto, a reação de aglutinação baseia-se na capacidade do anticorpo se ligar ao antígeno presente em uma superfície de grande partícula de tal forma que leva a uma alteração do estado fisco do antígeno que é denominada interação secundária.

A interação secundária pode ser identificada de diferentes maneiras como, por exemplo, quando o antígeno está presente em uma superfície de uma partícula grande como uma bactéria, fungos, látex ou um eritrócito; os anticorpos, uma vez ligados, levam estas partículas se agruparem de modo visível num fenômeno conhecido como aglutinação.

A Proteína C-Reativa (PCR) foi demonstrada por Tillet e Francis em 1930. Quimicamente a PCR é uma globulina pentamérica com mobilidade eletroforética na zona gama. A PCR é considerada uma proteína de fase aguda encontrada no soro em estados inflamatórios específicos ou não. A presente técnica utiliza uma reação de aglutinação de partículas de látex em lâmina que fornece resultados em 2 minutos.

2. OBJETIVOS

2.1 Objetivo Geral

Mostrar ao aluno, reações de formação do complexo antígeno-anticorpo “in vitro”.

2.2 Objetivo Específico

• Aprender a técnica de aglutinação passiva

• Determinar a proteína c reativa no soro

• Entender como funciona esta técnica e seu significado clínico.

3. MATERIAL E MÉTODOS

1 Centrífuga

Amostra Biológica (50 µl de soro)

1 agulha

1 seringa

Luvas

1 tubo seco para coleta de sangue (tampa vermelha)

1 estante

1 Kit PCR

1 placa de fundo escuro (acompanha o kit)

Palito para homogenizar os reagentes (acompanha o kit)

Pipeta Automática de 5µl - 20µl

Ponteiras Amarelas (menor volume)

Ponteiras Azuis

A finalidade do teste é a aglutinação passiva para detecção da proteína C – Reativa no soro humano. A proteína c-reativa (PCR) em altas concentrações está associada à infecções agudas, situações necróticas e a uma variedade de estados inflamatórios. A monitorização dos níveis de PCR nos permite avaliar a eficácia do tratamento e a recuperação do paciente.

As partículas de látex são sensibilizadas com anticorpos humanos anti-PCR. Quando se mistura a suspensão de látex contendo elevados níveis de PCR, irá produzir-se uma aglutinação nítida em um período máximo de 2 minutos.

• Em cada círculo da placa colocar:

Círculo Número 1 Círculo Número 2 Círculo Número 3 Círculo Número 4

Controle Negativo 50 µl - - -

Controle positivo - 50 µl - -

Amostra