Protocolo Para Realização De Eletroforese

1. DEFINIÇÃO

Eletroforese em gel é uma técnica de separação de moléculas que envolve a migração de partículas em um determinado gel durante a aplicação de uma diferença de potencial. As moléculas são separadas de acordo com o seu tamanho, pois as de menor massa irão migrar mais rapidamente que as de maior massa. Em alguns casos, o formato da moléculas também influi, pois algumas terão maior facilidade para migrar pelo gel. A eletroforese normalmente é utilizada para separar proteínas e moléculas de DNA e RNA.

2. OBJETIVO

Estabelecer o protocolo de uso da fonte e cubas para eletroforese, de forma a orientar o aluno no manuseio dos equipamentos necessários, sempre que for necessário.

5. ESPECIFICAÇÕES E CARACTERÍSTICAS DOS MATERIAIS

a) Fonte para eletroforese

- Marca – PWSys – PW300: equipamento indicado para a maioria dos procedimentos de eletroforese em cubas horizontais (Tensão: bivolt, com chave seletora)

Painel e visor de leitura: Painel tipo “touch” com visor de LCD, permitindo fácil visualização e monitoramento da voltagem, miliamperagem e potencia durante a corrida.

-Saídas para os cabos: Possui saída que permitem trabalhar com ate 4 cubas simultâneas, com o mesmo protocolo.

- Conectores: Conectores padrão com 4 mm.

- Sistema de ventilação: Sistema de ventilação eficiente para evitar aquecimento durante as corridas eletroforéticas longas.

b) Cuba horizontal Midi para eletroforese

- Marca: OMNIPHOR

- Modelo – HMMIDI10

- Tamanho: 10x10 cm

- Desenvolvida para checagens rápidas de fragmentos de PCR e clonagem.

- Compatível com bandejas 10x7 cm e 10x10 cm.

b.1) Componentes:

- Tanque com tampa

- 02 cabos com códigos de cores

- 01 bandeja transparente a UV 10x10 cm (espaço para 4 pentes);

- 02 delimitadores para moldagem do gel;

- 02 pentes de 16 amostras e 1 mm de espessura;

b.2) Especificações técnicas:

Dimensões do gel (L x P) 7x7 cm

Dimensões da cuba (L x P x A) 21x9x9 cm

Capacidade máxima de amostras 32 amostras

Volume de tampão 225 mL