Tecnica Para Analise De Agua

Índice

- introdução

- desenvolvimento

- conclusão

- bibliografia

Introdução

A seguir veremos como fazer uma analise microbiologia da agua, onde explico qual o material necessário, qual o procedimento usado e as técnicas para analise.

Recolha da amostra de água

As amostras de água para análise são colhidas em frascos de vidro ou plástico com 500 ml de capacidade, rolhados ou tapados com rolha de algodão, e que foram previamente esterilizados na autoclave.

Ao abrir e fechar o frasco, durante a colheita, deve-se ter o maior cuidado para evitar a ocorrência de contaminações que lhe sejam exteriores.

No caso de águas canalizadas:

Limpar a torneira ou local de passagem da água com algodão embebido em álcool etílico; deixar secar ao ar.

Deixar correr um pouco de água, antes da recolha.

Recolher a água num recipiente previamente esterilizado.

Obs: quando a água a analisar for água tratada com cloro, os frascos onde a amostra é recolhida devem conter um cristal de tiossulfato de sódio para neutralisar vestígios residuais daquele gás, o qual poderia causar a morte das bactérias porventura presentes na água.

Material necessário

Amostra de água colhida de acordo com as instruções descritas no procedimento experimental.

Para fazer diluições da amostra de água

(por exemplo, no caso de se prever que a água a analisar está muito contaminada):

Provetas esterilizadas (100, 500 e 1000 ml);

Água destilada esterilizada;

Pipetas automáticas (1-5 ml) e respectivas pontas esterilizadas.

Para a análise propriamente dita:

Material necessário.

Sistema de filtração em aço inox;

Bomba de vácuo;

Membranas filtrantes (porosidade - 0.45 μm) com reticulado, esterilizadas ;

Placas de Petri contendo meio selectivo para coliformes - meio "m-Lauryl Sulphate Broth" (comercial) agarizado contém peptona e extracto de levedura (fontes nutricionais complexas), lactose (fonte de C e energia para os coliformes), vermelho de fenol (indicador de pH, vermelho a pH neutro/amarelo a pH ácido) e lauril-sulfato de sódio (inibe o crescimento de bactérias Gram-positivas);

Pinça;

Copo com álcool a 95 º;

Bico de Bunsen;

2 estufas de incubação (a 37 e a 44.5 ºC).

Obs: O material utilizado deve ser previamente esterilizado. O sistema de filtração de inox é esterilizado directamente à chama do bico de Bunsen. O restante material de plástico ou vidro é previemente esterilizado na autoclave. As membranas filtrantes vêm esterilizadas de origem.

Pesquisa e enumeração de coliformes totais e fecais

Esterilizar o sistema de filtração (de aço-inox) directamente na chama do bico de Bunsen, deixar arrefecer e colocar uma membrana filtrante sobre o suporte de filtração.

Filtrar, sob vácuo, através da membrana filtrante, 100 ml (ou, 250 ml no caso de água engarrafada) da amostra de água colhida como descrito atrás .

obs: Realizar esta filtração em duplicado.

Colocar cada uma das membranas filtrantes sobre o meio selectivo para coliformes contido em placas de Petri, evitando a formação de bolhas de ar entre a membrana e o meio.

Incubar as duas placas com as membranas, uma a 37°C e a outra a 44.5ºC, durante 24 horas.

Contar as colónias amarelas formadas na superfície do meio sólido contido em cada uma das placas incubadas a 37ºC ou a 44.5ºC .

Verificar análise de resultados.

Estimar o nº presumível de Unidades Formadoras de Colónias (UFC) de coliformes totais e de coliformes fecais (termotolerantes) presentes em 100 mililitros da água analisada (ou, em 250 ml no caso de águas engarrafadas).

Concluir quanto à eventual qualidade bacteriológica da água em causa, com base nesses