Teste de Sensibilidade aos Antimicrobianos

Teste de Sensibilidade aos Antimicrobianos.

(Antibiograma ou T.S.A)

 Definição:

• É uma prova laboratorial que permite avaliar “In vitro” a sensibilidade de uma bactéria, aos, diversos antimicrobianos utilizados.

 Introdução:

• Este teste tem como finalidade principal auxiliar o clinico a ministrar uma terapêutica adequada frente aos diversos processos infecciosos, tendo em vista o aparecimento cada vez maior de bactérias resistentes (pôr ex: Enterobactérias, Pseudomonas) às drogas utilizadas.

• Existem dois métodos (cuidadosamente padronizados) pelos quais o antibiograma pode ser executado:

1. Método de diluição (M.I.C.)

2. Método de difusão (Kirby-Bauer)

• No primeiro, concentrações previamente determinadas das drogas são incorporadas ao meio de cultura (liquido ou sólidos) e, após semeadura da bactéria e incubação adequada, verifica-se a menor concentração da droga capaz de impedir o crescimento bacteriano (M.I.C). Este método, embora ideal, não tem aplicação rotineira tendo em vista dificuldades técnicas e alto custo.

• No segundo, deixa-se a droga difundir no meio de cultura sólido a partir de discos de papel filtro impregnado com antibióticos. Depois que a bactéria é inoculada, coloca-se os discos com concentração das drogas previamente determinadas e incuba-se. Se o crescimento da bactéria é inibido, forma-se ao redor do disco um halo de inibição cujo tamanho está relacionado com a difusão e concentração da droga e a sensibilidade bacteriana.

• Considerando-se que na rotina microbiológica, a técnica de maior utilização é a de difusão pelo sistema de discos, de acordo com o proposto pôr Kirby e Bauer, nos limitaremos em discutir em detalhes os aspectos técnicos a ela relacionados, “lembrando que um TSA é realizado sempre e somente após o devido isolamento e identificação do agente etiológico.”

Técnica de Kirby - Bauer:

Preparo do inoculo:

Transferir para 5ml de caldo simples ou salina estéril 5 colônias de bactérias (iguais) . Incubar a 36°, até obter turvação equivalente à metade do tubo n°1 de Mc Farland.

Se a densidade for maior, diluir com soro fisiológico ou água destilada estéril.

Semeadura:

Semear o inoculo em toda a superfície das placas de Muller-Hinton, cuja

espessura deve ser de 4 a 6 mm, previamente preparadas. Para semeadura utilizar

um Swab estéril. Retirar o excesso pressionando o Swab nas paredes do tubo.

A semeadura é feita de maneira uniforme e em superposição. Deixar a placa

secar em temperatura ambiente ou estufa por 5 a 10 minutos.

Colocação dos Discos:

A