TESTE DE SENSIBILIDADE ANTIMICROBIANA (TSA)

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1. INTRODUÇÃO

Desde as descobertas de Alexandre Fleming com a penicilina, começamos a ter  certa vantagem sobre doenças. A penicilina foi o primeiro antibiótico usado com  sucesso no tratamento de infecções causadas por bactérias. A palavra antibiótico  vem do grego e significa contra a vida – das bactérias.  

Um antibiograma é um ensaio que mede a susceptibilidade ou resistência de uma  bactéria aos antibióticos através do espectro de sensibilidade identificados na  placa de cultura. Ágar Müeller Hinton é um meio de cultura em placas  recomendado para a realização de antibiograma (teste de sensibilidade), é rico  proteínas e carboidratos que fornece o substrato ideal para o desenvolvimento e  crescimento de cepas bacterianas de interesse clínico.  

O teste é feito utilizando-se discos de difusão antibióticos depositados sobre a  superfície do meio onde se inoculou, por espalhamento, uma amostra de uma  cultura bacteriana previamente crescida em meio líquido.

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[pic 1]Fonte: Revista Eletrônica de Jornalismo Científico 2018.

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Os testes de sensibilidade são indicados, com maior frequência, quando se  acredita que o organismo causador pertence a uma espécie capaz de apresentar  resistência aos agentes antimicrobianos normalmente usados.  Todas as etapas envolvidas na realização dos TSA, desde a seleção dos  antimicrobianos a serem testados até a interpretação dos resultados, são  padronizadas por organizações especializadas como:  

● Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI, EUA);  

● British Society for Antimicrobial Chemotherapy (BSAC, Reino Unido);  ● Comité de L’Antibiogramme de la Société Française de  Microbiologie (CA-SFM, França).  

2. OBJETIVO(S)

O objetivo do teste de sensibilidade à difusão de disco de Kirby-Bauer é  determinar a sensibilidade ou resistência de bactérias e outros patógenos a vários  compostos antimicrobianos, a fim de auxiliar o médico na seleção de opções de  tratamento para seus pacientes. (JAN 2009).  

3. MATERIAIS E MÉTODOS

O método utilizado no antibiograma segue o protocolo de teste de sensibilidade à  difusão de disco Kirby-Bauer  

● Solução salina 

● Placa de Petri  

● Placas de ágar Mueller-Hinton

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● Discos antibióticos  

● Amoxicilina  

● Clorafenicol  

● Gentamicina  

● Sulfonamidas  

● Tetraciclina  

● Compasso de calibre ou régua 

● Bact-cinerator ou queimador de Bunsen  

● Swab  

● Cultura pura do organismo de 18 a 24 horas a ser testada  

● Alça ou agulha de inoculação  

Foi feita o cultivo das bactérias. Para isso, cumprimos as etapas de esfregaço,  fixação dos discos de antibiótico e, por fim, o cultivo da bactéria propriamente dito,  em solução de ágar Mueller-Hinton, em temperatura e umidade propícia, após um  intervalo de tempo, obtivemos os resultados.  

Figura 1 – Incubação de Bactéria Laboratório Microbiologia UVV.

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 Fonte: Lanny Barbosa Huhn (2019).

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Preparar as placas de Petri, através de esfregaço com swab.  

 Figura 2 – Preparação

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Aplicar os discos antimicrobianos na placas de ágar Mueller-Hinton inoculada  com as bactérias estudadas, Escherichia Coli e do gênero Pseudômonas.  

 Figura 3 – Discos Antimicrobianos

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Após o tempo de incubação, afere-se o tamanho do halo de inibição, conforme fig.  4, tendo como referências as tabelas de; “Padrões interpretativos do diâmetro da  zona para cada espécies”. (JAN 2009)

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 Figura 4 – Halo Inibição

[pic 5]

4. RESULTADOS

Utilizando a técnica de Kirby-Bauer, os resultados encontrados em sala de aula, se  baseia na medição do halo de inibição de cada antibiótico testado, tendo como  referência a tabela 1, de medidas abaixo citada, podemos verificar através das  informações coletadas, que a mesma bactéria pode ser resistente ou sensível a  vários tipos de antimicrobianos, esta resistência fortalece a utilização da técnica,  pois uma mesma cepa bacteriológica apresenta características únicas e  específicas na presença de cada antimicrobiano.  

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