Técnica De Gram

RELATÓRIO DE MICROBIOLÓGIA

A forma das bactérias pode ser observada através de coloração de Gram, que divide as bactérias em dois grupos: Gram-positivas e Gram-negativas. A reação das bactérias à técnica de Gram expressa diferentes características, a diferença básica entre um tipo e outro de bactéria está na sua parede celular. . As bactérias Gram-positivas possuem parede celular com uma única e espessa camada composta quase que completamente por peptideoglicanos, quando este tipo bacteriano entra em contato com a coloração de Gram adquirem a cor púrpura ou azul quando fixada com cristal violeta, estas bactérias retêm o corante presente nestas substâncias, não adquirindo a coloração do segundo corante. . As bactérias Gram-negativa possuem parede celular mais delgada composta por uma camada conseqüentemente frágil de peptideoglicanos e três outros componentes que a envolvem externamente: lipoproteína, membrana externa e lipopolissacarídeo. É constituída por estruturas de múltiplas camadas bastante complexas, quando em contato com a coloração Gram o lipídio da membrana mais externa é dissolvido no álcool e libera o primeiro corante, o cristal violeta, sendo descoloradas e quando acrescentados outros corantes, adquirem a nova coloração de tonalidade vermelha ou rosa. Como fatores de ataque ou agressão, as células gram-positivas e gram-negativas caracterizam-se por graus diferentes de virulência. As bactérias Gram-negativas são constituídas por uma endotoxina, o LPS, que lhes confere a propriedade de patogenicidade, enquanto nas bactérias Gram-positivas a exotoxina, composta pelo ácido lipoteinóico, tem como característica principal a aderência. . O procedimento de coloração de Gram consiste em flambar a alça bacteriológica e colocar na lâmina a solução salina; Flambar a alça novamente e coletar as bactérias; Passar rapidamente a lâmina sobre o fogo até secar o liquido; Aplicar a solução de cristal violeta (1min.); Lavar com água; Aplicar a solução de lugol (iodeto de potássio - KI), (1min.); Lavar com água; Gotejar álcool-acetona e lavar novamente; Aplicar a solução de safranina ou fucsina (30seg.); Lavar com água e secar no fogo, que resultarão na coloração positiva ou negativa. . Esta técnica da coloração de Gram permite distinguir os mais variados tipos de bactérias e que tipo de parede celular elas tem (se mais simples ou mais complexas, com mais ou menos peptideoglicanos – principal componente da parede celular bacteriana). As bactérias que descorarem quando submetidas à um solvente orgânico são Gram-negativas, e as que permanecerem coradas mesmo quando em contato com o solvente são denominadas Gram-positivas. Se for estruturalmente simples a coloração será positiva, se for estruturalmente complexa a coloração será então negativa. A bactéria Staphylococcus aureus é Gram-positiva com estrutura simples, e mesmo em contato com o solvente permanecem coradas é aproximadamente de cor roxa. A bactéria Escherichia coli é Gram-negativa com estrutura complexa, e em contato com o solvente descolorem e só adquire

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