A Seleção De Comprimento De Onda E Composição Da Fase Móvel

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UNIVERSIDADE FEDERAL DE CATALÃO

ANÁLISE INSTRUMENTAL EXPERIMENTAL

 PROFª. DRª. LUCIANA MELO COELHO

Cromatografia Líquida (HPLC) – seleção de comprimento de onda e composição da fase móvel

Autoras:

        Jullya Alves

        Jullyana Marques

Catalão-Go

Fevereiro, 2024

Introdução

Os componentes básicos dos instrumentos analíticos para a espectroscopia de absorção, bem como para espectroscopia de emissão e fluorescência, são notavelmente semelhantes em sua função e nos seus requisitos de desempenho, quer sejam desenhados para a radiação ultravioleta (UV), visível ou infravermelha (IV). Em razão dessas semelhanças, esses instrumentos são frequentemente designados por instrumentos ópticos, mesmo sabendo-se que o olho humano é sensível somente à região do visível. As características de instrumentos típicos projetados para a espectroscopia de absorção no UV, visível e IV.Os primeiros dois tipos de arranjo, para a espectroscopia de absorção e fluorescência, requerem uma fonte de radiação externa. Nas medições de absorção, a atenuação da fonte de radiação a um comprimento de onda selecionado é medida. Nas medições da fluorescência , a fonte excita o analito que produz a emissão de radiação característica, a qual é normalmente medida a um ângulo de 90° com respeito ao feixe incidente proveniente da fonte. Na espectroscopia de emissão a amostra é um emissor por si mesma e nenhuma fonte de radiação externa faz-se necessária. Em métodos de emissão, a amostra é em geral introduzida em um plasma ou uma chama que provê energia térmica suficiente para levar o analito a emitir uma radiação característica. As respectivas células, janelas, lentes, espelhos e elementos de seleção de comprimento de onda devem, nos instrumentos de espectroscopia óptica, transmitir a radiação na região de comprimento de onda investigada. As faixas de comprimento de onda são úteis para vários materiais ópticos que são empregados nas regiões do UV, visível e IV do espectro. O vidro silicato comum é completamente adequado para o uso na região do visível e apresenta a grande vantagem de ser de baixo custo.

Objetivo

Apresentação do comprimento de onda e a separação da fase móvel

Metodologia

O comprimento de ondas e de sensibilidade é utilizado o sistema de injeção manual, onde foi injetado a mistura contendo benzeno e tolueno utilizando o volume de injeção de conforme o volume do looping do equipamento, Onde foi utilizado acetonitrila:água (70:30 v/v), fluxo de 1,0 mL min-1 como modo de eluição e variar o comprimento de onda (λ, nm) do detector de UV conforme a tabela abaixo:

	Área
λ (nm)	Benzeno	Tolueno
300	3141	5962
254	364871	242318
220	1938288	13904

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