MORFOLOGIA BACTERIANA - COLORAÇÃO DE GRAM

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MINISTÉRIO DA EDUCAÇÃO

 SECRETARIA DE EDUCAÇÃO PROFISSIONAL E TECNOLÓGICA

INSTITUTO FEDERAL DE EDUCAÇÃO, CIÊNCIA E TECNOLOGIA FARROUPILHA-CAMPUS SANTO AUGUSTO

CURSO SUPERIOR EM TECNOLOGIA DE ALIMENTOS

BRUNA PEREIRA DE LIMA

LARISSA BAHRY SOARES

LUANA PEREIRA DE LIMA

MARÍLIA WICHINHESKI

MORFOLOGIA BACTERIANA - COLORAÇÃO DE GRAM

Relatório de Microbiologia

Santo Augusto, 2017.

SUMÁRIO

1.        Introdução        3

2.        Objetivos        4

3.        Material e Método        5

3.1 Material        5

3.2 Método        5

4. Resultados        6

5. Discussão e conclusão        7

Referencias        8

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1. Introdução

A coloração de Gram é uma técnica de coloração para diferenciação de microrganismos através das cores, para a observação em microscópio óptico.A técnica recebeu este nome em homenagem ao médico dinamarquês Hans Cristian Joaquim Gram.
        Por volta de 1884, Hans Gram observou que as bactérias, após serem tratadas com diferentes corantes, adquiriram cores diferenciadas.  

 Segundo Tortora, os diferentes tipos de bactérias reagem de modo distinto à coloração de Gram, pois diferenças estruturais em suas paredes celulares afetam a retenção ou a liberação de uma combinação de cristal violeta e iodo. As bactérias gram-positivas possuem uma parede celular de peptideoglicano mais espessa (dissacarídeos e aminoácidos) que as bactérias gram-negativas. Além disso, as bactérias gram-negativas contêm uma camada de lipopolissacarídeo (lipídeos e polissacarídeos) como parte de sua parede celular. Quando aplicados a células gram-positivas e gram-negativas, o cristal violeta e o iodo penetram facilmente nas células. O complexo cristal violeta e iodo, é maior que a molécula de cristal violeta que penetrou na célula e, devido a seu tamanho, não pode ser removido da camada intacta de peptideoglicano das células gram-positivas pelo álcool.

Consequentemente, as células gram-positivas retêm a cor do corante cristal violeta e permanecem com a cor púrpura, já as células gram-negativas não retêm o corante e ficam incolores até serem contra-coradas com um corante vermelho.

A técnica de Gram é fundamental para a taxonomia e identificação das bactérias, sendo muito utilizada atualmente, como técnica de rotina em laboratórios de bacteriologia

Sendo assim, o objetivo da prática foi o de executar a técnica de coloração de Gram, de modo que fosse possível observar de modo prático a diferença de coloração entre as bactérias gram-negativas e gram-positivas, bem como observar a morfologia destas.

1. Objetivos

• Evidenciar micro-organismos;
• Verificar diferenças morfológicas dos micro-organismos;
• Observar o comportamento tintorial dos tipos de bactérias utilizando a coloração de Gram;
• Realizar a técnica de coloração de Gram.

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1. Material e Método

3.1 Material

• Bateria de corantes (cristal de violeta e fucsina) e reagentes (álcool e lugol) Para técnica de Gram;
• Cultura de micro-organismos;
• Lâminas;
• Alça de platina ou palito de dente;
• Lamparinas;
• Óleo de imersão;
• Microscópio óptico;
• Algodão ou papel toalha.

3.2 Método

        

        Inicialmente realizou-se um esfregaço da amostra do material microbiológico na lâmina.

Passou-se a lâmina sobre a lamparina para fixar e deixou secar em temperatura ambiente.

Cobriu-se o esfregaço com a solução corante de cristal violeta, durante 1 minuto.

Lavou-se rapidamente para retirar o cristal violeta com água.

Novamente cobriu-se o esfregaço com a solução de lugol (iodo-iodeto) durante 30 segundos. Em seguida lavou-se com etanol (10 a 15 segundos) e, em seguida, com água.

Cobriu-se a lâmina com a solução corante de fucsina durante 1 minuto. Enxaguou-se novamente com água e secou-se com papel absorvente suavemente.