O DEPARTAMENTO DE QUÍMICA FÍSICOQUÍMICA EXPERIMENTAL LICENCIATURA

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UNIVERSIDADE FEDERAL DA PARAÍBA

CENTRO DE CIÊNCIAS EXATAS E DA NATUREZA - CCEN

DEPARTAMENTO DE QUÍMICA

FÍSICOQUÍMICA EXPERIMENTAL

LICENCIATURA

MARIA FRANCILEIDE DA SILVA MADRUGA / 20180111550

PRÁTICA N° 7: CATÁLISE ENZIMÁTICA VIA FOTOCOLORIMETRIA

JOÃO PESSOA – PB

2022

TRATAMENTO DE DADOS

1. Calcule as concentrações de catecol usadas no experimento, ou seja, as concentrações finais dentro da cubeta. Lembre-se: C1 .V1 = C2 .V2. Use esta concentração nos cálculos.

C1.V1 = C2.V2

Cubeta 1 🡪        0,05 mol/L . 0,0005 L = C2 . 0,003 L

0,000025 mol = C2 . 0,003L

C2 = 0,000025 mol / 0,003 L = 0,0083 mol/L

C1.V1 = C2.V2

Cubeta 2 🡪        0,05 mol/L . 0,00075 L = C2 . 0,003 L

0,000037 mol = C2 . 0,003L

C2 = 0,000037 mol / 0,003 L = 0,0125 mol/L

C1.V1 = C2.V2

Cubeta 3 🡪        0,05 mol/L . 0,001 L = C2 . 0,003 L

0,00005 mol = C2 . 0,003L

C2 = 0,00005 mol / 0,003 L = 0,0167 mol/L

C1.V1 = C2.V2

Cubeta 4 🡪        0,05 mol/L . 0,0015 L = C2 . 0,003 L

0,000075 mol = C2 . 0,003L

C2 = 0,000075 mol / 0,003 L = 0,0250 mol/L

2. Faça um gráfico de absorbância versus tempo e calcule as velocidades iniciais (v0) a partir do coeficiente angular para cada uma das cinéticas realizadas.

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3. Determine Km e Vmax a partir do tratamento gráfico, de acordo com o ajuste dos dados à equação e discuta o resultado.

Vmax = 0,008536      Km = 0,006616

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        De acordo com o gráfico, observamos que a velocidade inicial da reação é medida sobre uma escala de concentrações de substrato [S] e a velocidade de reação, aumenta com o acréscimo do substrato. À medida que o substrato aumenta, a enzima satura-se e a velocidade atinge o valor máximo Vmax. A concentração de enzimas afeta a velocidade máxima da solução pois, até certo ponto de equilíbrio, quanto mais enzimas ligadas aos substratos, mais rapidamente a reação será concluída.

QUESTÕES PARA O RELATÓRIO

1. Como podem ser definidas as enzimas? O que é substrato?

        As enzimas são proteínas que catalisam reações químicas de forma muito eficiente, nesse caso, foi utilizado uma batata. Substrato: é o reagente que será usado juntamente com a enzima da batata, formando, um complexo enzima-substrato (intermediário da reação).

2. Que fatores podem explicar a alta eficiência das enzimas como catalisadores?

        Um fator muito importante que pode explicar essa eficiência das enzimas como catalisadores é que chamamos de hipótese de fechadura chave, onde a enzima tem a capacidade em distinguir entre ligações glicosídicas alfa e beta que é quando numa síntese enzimática de proteínas, os polipeptídeos constituídos por mais de 1000 resíduos de aminoácidos são sintetizados virtualmente sem erro. Na reação que é catalisada por uma enzima, o substrato e a enzima combinam-se para formar um complexo enzima-substrato, esse complexo por sua vez, induz uma mudança na conformação da enzima, fazendo com que ela se ligue ao substrato de forma mais eficiente.

        Os sítios catalíticos são extremamente sensíveis ao substrato com o qual são colocados. Desse modo, uma especificidade por parte das enzimas para com determinados substratos. De fato, para certos substratos há apenas uma enzima específica capaz de catalisar uma reação com eficiência.

 3. Qual a definição e o significado de Km e vmax na reação. Veja as unidades.

        A constante de Michaelis-Menten (Km) é a concentração de substrato necessária para que a velocidade enzimática seja metade da velocidade total e Vmax é a velocidade máxima de catálise de uma enzima. A medida da velocidade máxima é a medida da quantidade de substrato convertida em produto em dado período de tempo, e pode ter como unidade μM.min-1. A unidade de Km é a mesma para a medida do substrato (mM, μM...).