PROCEDIMENTO ENSAIO

O presente método prescreve os procedimentos para lavagem, preparo e esterilização de vidrarias e outros materiais utilizados em laboratórios de microbiologia.

2. APLICAÇÃO

Este método aplica-se diretamente para materiais e vidrarias utilizados no laboratório de microbiologia.

3. EPI’s UTILIZADOS

• Luvas

• Jaleco

4. PREPARO DE REAGENTES

4.1 Sabão 0,1%

Solução de detergente não tóxico (Extran)

Diluir 1,0 mL do detergente com água purificada até completar 1L, armazenar em temperatura ambiente.

4.2 Alcool 70%

Realizar a preparação de acordo com o exemplo:

Preparo de 1L de álcool 70% a partir de uma concentração de 92,8%.

Exemplo:

92,8%¬¬¬¬¬¬¬____________1000ml → X= (70×1000) X= 754,3mL

70%____________X 92,8

Diluir 754,3mL de álcool com água purificada até completar 1L, armazenar em temperatura ambiente, por até uma semana.

4.3 Hipoclorito de Sódio 1,5%

Realizar a preparação de acordo com o exemplo:

Preparo de 1L de hipoclorito 1,5%.

Exemplo:

100%¬¬¬¬¬¬¬____________1000mL → X= (1,5×1000) X= 15mL

1,5%____________X 100

Diluir 15mL de hipoclorito com água purificada até completar 1L, armazenar em temperatura ambiente, por até uma semana.

5. LAVAGEM, ESTERILIZAÇÃO E PREPARO DE MATERIAIS

5.1 Descontaminação Prévia do material

Atividade obrigatória a ser realizada antes da lavagem de vidraria ou outros materiais que forem utilizados na realização de análises microbiológicas, todo material utilizado em analises poderá conter microorganismos viáveis, por isso deve ser autoclavado a temperatura de 121°C à 127ºC por 30 minutos antes de ser lavado. A execução desta atividade garante a segurança dos técnicos responsáveis pela lavagem e evita a contaminação dos corpos receptores no qual são lançados os despejos da lavagem desses materiais. Para itens não resistentes a autoclavação, utilizar processo de desinfecção adequado.

5.2 Frasco de diluição

Após o processo de descontaminação previa, os frascos utilizados devem ser esvaziados e escovados em seu interior com o auxilio de um cepilho embebido em solução de detergente 0,1%. Enxaguar em água corrente, o último enxágüe deve ser de água purificada. Deixar escorrer em estante.

5.3 Tubos de ensaio

Lavar o interior de cada um separadamente com um cepilho contendo solução de detergente á 0,1%. Enxaguar com água corrente, o último enxágüe deve ser de água purificada. Secar em estufa a 170 a 180ºC por 2 horas.

5.4 Pipetas

Após o processo de descontaminação previa, emergir as pipetas em recipiente contendo solução de detergente a 0,1%. Lavá-las com a solução e enxágüar em água corrente, o último enxágüe deve ser de água purificada. Secar em estufa de 170 a 180ºC, durante 2 horas. Após secagem, tamponar o bocal das pipetas com algodão, embrulhar em papel Kraft em grupos de 5 à 10 pipetas, identificar na parte externa do pacote o volume e data de esterilização e as pontas com uma seta para baixo para facilitar a abertura do embrulho. Autoclavar em temperatura de 121 a 127°C durante 30 minutos, levar novamente a estufa a 170 à 180ºC até que estejam completamente secos, tomando cuidado para não queimar o papel protetor, identificar os lotes esterilizados