Antiseptico E Desinfetantes

Intrinsica resistencia de esporos bacterianos.

Esporos bacterianos dos gêneros Bacillus e Clostridium tem sido amplamente estudados e são invariavelmente os mais resistentes de todos os tipos de bactérias anti-sépticos e desinfetantes (43, 46, 150, 414, 418, 420, 422, 423, 457). Embora geralmente não são Bacillus patogênicos, seus esporos são amplamente utilizados como indicadores de esterilização eficiente. Clostridium são agentes patogênicos significativos; por exemplo, C. difficile é a causa mais comum de diarréia hospitalar (478). Muitos produtos biocidas são bactericidas ou bacteriostáticos em baixas concentrações de bactérias não esporuladas, incluindo as células vegetativas da espécie Bacillus e Clostridium, mas concentrações elevadas pode ser necessárias para obter um efeito esporicida (por exemplo, para glutaraldeído e CRAs).

Pelo contrário, ainda elevadas concentrações de álcool, fenólicos, QACs e clorexidina carecem de um efeito de esporicida, embora isto pode ser conseguido quando estes compostos são usados a temperaturas elevadas (475). Um típico esporo tem uma estrutura complexa (29, 151). Em suma, as células germinativas (protoplastos ou núcleo) e paredes de células germinativas são rodeados do córtex, fora que são os Casacos de esporos de interior e exterior. Uma fina exosporium pode estar presente os esporos de algumas espécies, mas pode envolver apenas um Brasão de esporos. RNA, DNA e DPA, bem como a maioria do cálcio, potássio, manganês e fósforo, está presente no protoplastos esporos. Também estão presentes grandes quantidades de proteínas básicas baixa massa molecular (pequenas esporos solúveis em ácido proteínas [SASPs]), que são rapidamente degradadas durante a germinação. O córtex consiste em grande parte peptidoglicano, incluindo um lactâmico de muramico específicos de esporos. Os Casacos de esporos constituem uma parte importante dos esporos. Estas estruturas consistem principalmente de proteínas, com uma fração álcalis solúvel composta por Polipeptídeos ácidos, sendo encontrados no Brasão do interior e uma fração alcalina resistente associada com a presença de obrigações Dissulfeto rico sendo encontrado no Brasão do exterior. Estes aspectos, especialmente as funções do coat(s) e do córtex, são todos relevantes para o mecanismo(s) da resistência apresentada pelos esporos bacterianos anti-sépticos e desinfetantes. Várias técnicas estão disponíveis para estudar mecanismos de resistência de esporos (428). Eles incluem removendo o Brasão de esporos e córtex, usando uma técnica de "step-down" para alcançar um esporulação altamente síncrona (de modo que as alterações celulares podem ser monitoradas com precisão), empregando esporos mutantes que não esporuladas para além dos estágios geneticamente determinados em esporulação, adicionando um anti-séptico ou um desinfetante no início da esporulação e determinar o quão longe o processo podem prosseguir e analisar o papel dos SASPs. Tais procedimentos ajudaram a fornecer uma quantidade considerável de informações úteis. Esporulação propriamente dita é um processo no qual uma célula vegetativa desenvolve em esporos e envolve sete estágios (designados 0 a VII). Durante esse processo, a célula vegetativa (fase 0) sofre uma série de modificações morfológicas que culminan na libertação de uma maturidade esporos (fase VII). Fases (desenvolvimento de córtex) IV a VII são os mais importantes no desenvolvimento de resistência aos biocidas. Resistência à anti-sépticos e desinfetantes se desenvolve durante esporulação e pode ser um evento inicial, intermediário ou tardio (muito) (103, 375, 378, 429, 474). Marcadores úteis para acompanhamento do desenvolvimento de resistência são tolueno (resistência aos quais é um evento precoce), calor (intermediário) e lisozima (tardia) (236, 237). Estudos com um subtilis B. de tipo selvagem da estirpe, 168 e seus mutantes Spo- ajudaram a determinar as fases em que se desenvolve resistência (262, 375, 474). Estes estudos (Fig. 2), a ordem do desenvolvimento da resistência era tolueno (marcador), formaldeído, sulfato laurílico de sódio, fenol e nitrato fenilmercúrico; m-cresol, clorocresol, gluconato de clorexidina, cloreto de cetilpiridinium e cloreto de mercúrio; e calor úmido (marcador), dicloroisocianurato de sódio, hipoclorito de sódio, lisozima (marcador) e glutaraldeído. Assim, é demonstrada a associação da superveniência da resistência a um

determinado anti-séptico ou desinfetante com um estagio(s) especial no desenvolvimento de esporos. Formulários de Brasão-menos de esporos, produzidos por tratamento de esporos. Condições alcalinas com uréia plus ditiotreitol acrescido de sódio laurílico sulfato (UDS), foram também de valor em estimar o papel dos casacos em limitar o acesso de anti-sépticos e desinfetantes aos seus sites de destino. No entanto, Bloomfield e Arthur (44, 45) e Bloomfield (43) demonstraram que este tratamento também remove certa quantidade de córtex e que o montante do córtex restante pode ainda ser reduzida pela utilização subsequente de lisozima. Estas conclusões demonstram que os Casacos de esporos têm um papel inquestionável no que conferem resistência, mas que o córtex é também uma barreira importante desde (UDS mais lisozina) - esporos tratados são muito mais sensíveis aos agentes de iodo-liberação de clorinas que estão expostas ao UDS esporos. O desenvolvimento inicial e a data de vencimento do córtex estão implicados no desenvolvimento de resistência aos fenólicos. Da mesma forma, agora é claro que o desenvolvimento do córtex, pelo menos, é parcialmente responsável por resistência clorexidina e QACs; esta resistência é aprimorada no desenvolvimento de esporos pelo início do Brasão de síntese esporos (262). O efeito de diferentes concentrações de clorexidina, subletais às bactérias vegetativas, no desenvolvimento de esporos do B. subtilis 168 MB2 foram investigados pela Knott e Russell (261). Eles descobriram que desenvolvimento de esporos de clorexidina afetado; as concentrações da hexametilenobiguanida aumentada, valores de índice de esporos (a porcentagem de células formando esporos) diminuíram e aumento da sensibilidade ao calor e tolueno. Por outro lado, a cultura de controle (não tratada) foi altamente resistente a ambos estes agentes e tinha um valor de índice elevado de esporos, indicativo de níveis elevados de esporos maduros. Ligeiramente maior resistência à tolueno comparado a resistência ao calor não foi surpreendente, uma vez que as células devem chegar fases V, VI (síntese de Casacos de esporos e maturação) para atingir a resistência ao calor, mas apenas a fase III (um com a forespore duração) para atingir a resistência de tolueno (Fig. 2); em outras palavras,