Fertilização in Vitro
Por: nathysantosm • 25/5/2015 • Monografia • 5.647 Palavras (23 Páginas) • 857 Visualizações
UNIVERSIDADE DO VALE DO ITAJAÍ
CENTRO DE CIÊNCIAS TECNOLÓGICAS, DA TERRA E DO MAR
CURSO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS – ÊNFASE EM BIOTECNOLOGIA
Implantação e Desenvolvimento da Metodologia de Fecundação in vitro de Camundongos no Laboratório de Biotecnologia da Reprodução da Univali
UNIVERSIDADE DO VALE DO ITAJAÍ
CENTRO DE CIÊNCIAS TECNOLÓGICAS, DA TERRA E DO MAR
CURSO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS – ÊNFASE EM BIOTECNOLOGIA
Implantação e Desenvolvimento da Metodologia de Fecundação in vitro de Camundongos no Laboratório de Biotecnologia da Reprodução da Univali
Itajaí, 10 de dezembro, 2008
SUMÁRIO
AGRADECIMENTOS
SUMÁRIO
LISTA DE FIGURAS
LISTA DE TABELAS
RESUMO
INTRODUÇÃO
Ciência em Animais de Laboratório
Animais Transgênicos e Geneticamente Modificados
Banco de Gametas
Fecundação in vitro (FIV)
OBJETIVOS
Objetivo Geral
Objetivos Específicos
MATERIAIS E MÉTODOS
RESULTADOS
DISCUSSÃO
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
APÊNDICE
LISTA DE FIGURAS
Figura 1. Oócitos degenerados obtidos em 41,9% dos experimentos, foto de microscópio invertido em aumento de 400x................................................................................................. 11
Figura 2.Oócitos não fecundados (A) e embrião na primeira divisão celular apresentando corpúsculo polar (B), em microscópio invertido e aumento de 400x.......................................12
Figura 3. Foto de dois Blastocistos obtidos no procedimento 4,em meio IVF de fecundação e G1 de cultura, em microscópio invertido e aumento de 400x.................................................12
Figura 4. Resultados da fecundação in vitro realizada nos 2356 oócitos das 41 rotinas realizadas..................................................................................................................................13
Figura 5. Desenvolvimento embrionário dos 171 oócitos nos quais a clivagem foi observada..................................................................................................................................13
Figura 6. Clivagem observada em cada meio de fecundação entre as 41 rotinas realizadas....15
LISTA DE TABELAS
Tabela 1. Meios utilizados nos procedimentos...........................................................................8
Tabela 2. Resultados da Fecundação in vitro e desenvolvimento embrionário dos oócitos murinos utilizados neste experimento.......................................................................................11
Tabela 3. Fecundação e desenvolvimento embrionário nas 11 rotinas nas quais clivagem foi observada..................................................................................................................................14
Tabela 4. Porcentagem de utilização e clivagem dos cruzamentos entre linhagens................15
RESUMO
A tendência à utilização de animais modelos geneticamente modificados é cada vez maior, o que aumenta a necessidade da implantação de técnicas para reproduzir estas linhagens. A fecundação in vitro é uma valiosa ferramenta para essas tecnologias, consiste na união do óvulo e do espermatozóide em um ambiente de laboratório totalmente controlado, obtendo embriões viáveis para tranferí-los a uma fêmea receptora. Neste estudo foram realizados 41 procedimentos, onde foram testados diferentes metodologias, meios, linhagens e materiais. Foram utilizados gametas de animais das linhagens SWISS-ALBINA e F1(C57bl/6 x Swiss) e 4 diferentes meios para fecundação e cultura (IVF/G1, GV, HTF e KSOM). Foi observado taxa de clivagem em apenas 11 ensaios, e no restante contaminação ou degeneração celular. O meio GV apresentou as melhores taxas de clivagem entre os ensaios que formaram embrião. Analisando as linhagens utilizadas a combinação Swiss fêmea x F1 macho se mostrou presente em 67% dos procedimentos que obtiveram divisão celuar. A formação de blastocisto foi evidenciada em apenas uma rotina totalizando 0,1% dos oócitos utilizados.
INTRODUÇÃO
Ciência em Animais de Laboratório
Linhagens de camundongos têm sido utilizadas como modelos experimentais de pesquisa biomédica desde o início do século XX (SOARES et al., 2004). O camundongo é o animal experimental mais utilizado por apresentar notáveis vantagens, tais como tamanho pequeno, fácil criação e manipulação, baixo custo de manutenção, apresentar grande diversidade genética e ter uma reprodução rápida e eficaz a qual permite a avaliação do objeto de pesquisa por diversas gerações em curto período de tempo (BARBOSA; MEDEIROS; AUGUSTO, 2006). Atualmente existem cerca de 12 mil linhagens de camundongos disponíveis para pesquisa científica (DAVISSON e TAFT, 2006), onde cada linhagem é destinada para uma área biomédica ou doença. Essa diversidade genética surgiu através de mutações espontâneas ou de técnicas recentes de manipulação genética de embriões como a transgenia (PESQUERO et al., 2007).
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