Bilirrubina Total

Bilirrubina Total

A amostra utilizada para a realização das análises foi o soro, empregando um método colorimétrico e de ponto final.

O método se baseia na separação da bilirrubina direta do seu conjugado e da indireta da albumina, pela ação de um determinado reagente.

Amostra: Soro

Linearidade: Até 30mg/dL

Cálculos: A1 × 0,81=A1 corrigido

A2-A1 corrigido =Abs

Fator = [ ]C/(Abs C) Abs×Fator

Procedimento

Coletou-se 5ml de sangue de um voluntário com o auxílio de uma seringa sem adição de anticoagulante, pois logo em seguida a amostra foi centrifugada em 2500 rpm para a obtenção do soro.

Dois tubos de ensaio foram devidamente identificados como B (branco) e T (teste) e foram adicionados as seguintes substâncias em suas respectivas quantidades:

B T

Reagente 1 0,8mL 0,8mL

Amostra - 50µL

Água 50µL -

Em seguida foram incubados a 37º C por 5 minutos e depois foi realizada a leitura das soluções no espectrofotômetro em um comprimento de onda de 546 nm para a obtenção da absorbância de cada um. Os resultados foram estes:

B T

Absorbâncias 0 0

Feita a leitura das amostras, foi adicionados a cada um deles 200µL do reagente 2, sendo posteriormente incubados a 37º C por 5 minutos, com subseqüente leitura a 546nm, chegando aos seguintes resultados:

B T

Absorbâncias 0 0,015

Bilirrubina Direta

Através da utilização do ácido sulfânico como reagente 1, ocorre minimização da interferência da bilirrubina indireta e dessa forma só a direta é dosada.

Amostra: Soro

Linearidade: Até 12mg/dL

Cálculos: A1 × 0,81=A1 corrigido

A2-A1 corrigido =Abs

Fator = [ ]C/(Abs C) Abs×Fator

Procedimento

Dois tubos de ensaio foram devidamente identificados como B (branco) e T (teste) e foram adicionados à eles os reagentes abaixo:

B T

Reagente 1 1,00mL 1,00mL

Amostra - 100µL

Água 100µL -

Incubou-se por 5 minutos a 37ºC e foram feitas as leituras no espectrofotômetro a 546nm, obtendo estes resultados de absorbância:

B T

Absorbâncias 0 0,015

Adicionou-se