DETECÇÃO DOS PRINCIPAIS GONONÉIS

DETECÇÃO DOS PRINCIPAIS GENOGRUPOS (Wa-like/DS-1-like/AU-1-like) DE ROTAVÍRUS A ANTES E APÓS A INTRODUÇÃO DA ROTARIX® (Wa-like) NO BRASIL

Introdução: A Organização Panamericana de Saúde e o Grupo de Assessoria Estratégica de Especialistas em Imunização da Organização Mundial de Saúde declararam em 2006 e 2007 que a introdução de uma vacina era prioridade nas Américas com a meta de prevenir mortes e hospitalizações causadas por os rotavírus da espécie A (RVA). Mais 40 países incorporaram a vacina monovalente G1P[8] (Rotarix® - RV1) no Programa Nacional de Imunizações (PNI). No Brasil a RV1 foi introduzida no PNI em março de 2006. Após sua introdução observou-se uma mudança no perfil epidemiológico dos RVA circulantes na população, assim como uma redução de mortes e hospitalizações.

Objetivos: Analisar a diversidade genética de RVA de diversos genótipos (G1P[8] (n=90;1986-2013), G2P[4] (n=53;2005-2011), G3P[8] (n=26;2005-2011), G9P[8] (n=48;2001-2011), G12P[8] (n=3;2006-2011) e G12P[9] (n=2;2008-2010) detectados no Brasil antes e após a introdução da vacina RV1 pelo PNI, tanto em crianças vacinadas quanto não vacinadas, com o intuito de identificar e caracterizar variantes de RVA emergentes e reemergentes.

Metodologia: O ARN das amostras analisadas foi extraído utilizando o método de Boom adaptado. Os genes que codificam para as proteínas VP7 e VP8* foram amplificados e sequenciados. 117 cepas foram selecionadas para análise da constelação gênica. Os 11 segmentos gênicos foram amplificados utilizando o Kit OneStep RT-PCR (QIAGEN®). As sequencias foram obtidas através da plataforma de sequenciamento de Bio-Manguinhos e PDTIS (Fiocruz), e editadas e analisadas usando os programas: SeqMan™, Bioedit v.7.2.3, MEGA5.0, FindModel/Model Generator.

Resultados: As cepas de RVA genótipo G1P[8], G3P[8], G9P[8], G12P[8] analisadas revelaram uma constelação gênica Wa-like: I1-R1-C1-M1-A1-N1-T1-E1-H1. Enquanto, as cepas G2P[4] e G12P[9] revelaram uma constelação gênica DS-1-like (I2-R2-C2-M2-A2-N2-T2-E2-H2), e AU-1-like (I3-R3-C3-M3-A3-N3-T3-E3-H6), respectivamente. A análise dos sítios antigênicos das proteínas VP7 e VP8* das amostras brasileiras comparando com a RV1 demonstrou que a maioria das mudanças observadas já estavam presentes antes da introdução da vacina.

Conclusão: Diversas variantes genéticas dos genótipos analisados foram observadas circulando no período de 1986-2013 no Brasil. Todas as cepas P[8] (Wa-like) foram homotípicas quando comparadas com a RV1, enquanto as cepas G2P[4] (DS-1-like) e G12P[9] (AU-1-like) foram heterotípicas. Provavelmente a variação do perfil epidemiológico dos RVA esteja relacionada a diversos fatores como características genéticas restritas ao hospedeiro, concentrações elevadas de anticorpos específicos para RVA no leite materno, níveis de IgA específicos de RVA no lúmen do intestino, entre outros. Lembremo-nos de que a eficácia da vacina não é 100%, e sendo assim, se espera que crianças vacinadas ainda apresentem gastroenterite.