Reação Em Cadeia De Polimerase (PCR)

FACULDADE INDEPENDENTE DO NORDESTE

HIGOR SILVA DUTRA

COLEGIADO DE FARMÁCIA

Transcrição, Tradução e PCR

VITÓRIA DA CONQUISTA

2013

FACULDADE INDEPENDENTE DO NORDESTE

BIOLOGIA GERAL

Transcrição, Tradução e PCR

Resumo número 02 da componente curricular Biologia Geral, para submissão de avaliação parcial da III unidade.

Orientador: Prof. Marcelo José Espinheira

VITÓRIA DA CONQUISTA

2013

Índice

1. Transcrição...................................................................................3

1.1 Transcrição em Procariotos....................................................3 e 4

1.2 Transcrição em Eucariotos.....................................................4 e 5

2. Tradução.......................................................................................5 e 6

2.1 Iniciação da Cadeia.................................................................6

2.2 Alongamento da Cadeia..........................................................6

2.3 Término da Cadeia..................................................................7

3. Reação em Cadeia da Polimerase (PCR).....................................7

4. Referências Consultadas..............................................................8

 

1. Transcrição

Transcrição é o processo de formação do RNA a partir do DNA. Ela é realizada por um complexo enzimático cuja enzima chave é a enzima RNA polimerase, composta de várias subunidades e que realiza a polimerização do RNA a partir de um filamento molde de DNA. Esse processo ocorre sempre no sentido do carbono 5’ → 3’.

A transcrição passa por um processo de três etapas principais: a iniciação, o alongamento e o término da cadeia de RNA.

Os moldes de DNA contêm regiões chamadas de sítios promotores que ligam especificamente a RNA polimerase e determinam onde começa a transcrição.

As moléculas de RNA que são traduzidas nos ribossomos são chamadas RNA mensageiros. Nos procariontes, os produtos de transcrição, o transcrito primário, em geral é equivalente à molécula de RNAm.

Nos eucariontes, os transcritos primários devem ser processados pela excisão de sequências específicas e pela modificação de ambas as pontas antes de ser traduzido. Portanto, nos eucariontes, os transcritos primários em geral são precursores de RNAm, e como tal, chamados de pré-RNAm. A maioria dos genes nucleares nos eucariontes contém sequencias não-codificantes chamadas íntrons que separam as sequências codificantes ou éxons destes genes. Todas as sequências destes genes divididos são transcritas em pré-RNAm, e as sequências íntrons não-codificantes são subsequentemente removidas por reações de recombinação (splicing) feitas em estruturas macromoleculares chamadas spliceossomos.

Todos são sintetizados a partir de sequências de bases de DNA. Eles estão todos envolvidos na síntese de proteínas, mas cada classe de RNA tem uma função diferente.

1.1 Transcrição em Procariontes

As características básicas da transcrição são as mesmas tanto em procariontes quanto em eucariontes, mas muitos dos detalhes como as sequências promotoras são diferentes.

Início das Cadeias de RNA: Envolve três etapas, que são:

- Ligação de uma holoenzima RNA polimerase a uma região promotora no DNA; Desenvolvimento localizado dos dois filamentos de DNA pela RNA polimerase, dando um filamento molde livre para pareamento de bases com os ribonucleotídios que chegam; Formação de ligações fosfodiéster entre os primeiros ribonucleotídios na cadeia de RNA nascente.

- Região Promotora: pequena seqüência de nucleotídeos reconhecida por uma RNA polimerase como ponto onde deve se ligar ao DNA para iniciar a transcrição.

- Promotores apresentam seqüências de consenso (sequências de nucleotídeos que estão presentes em elementos genéticos conservados para serem reconhecidas) altamente conservadas que são reconhecidas pela enzima. Seqüências de consenso: 35: 5’-TTGACA-3’, 10: 5’-TATAAT-3’.

Alongamento das Cadeias de RNA: Ocorre dentro da bolha de transcrição. A