Determinação de Cafeína por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência em Fase Reversa

[pic 1]

Campus Duque de Caxias

Determinação de Cafeína por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência em Fase Reversa

Alunos: Caroline Assunção Corrêa, Cibelle Marques, Cíntia Cardoso, Jeferson Lima, Harley Silva e Thiago Mansur

Turmas: PGM-261 E PGC-341

Duque de Caxias, 27 de fevereiro de 2014.

1) Objetivo

O objetivo desta prática é verificara presença das metilxantinas, cafeína e a teobromina, em amostras diversas por HPLC com coluna de fase reversa (C18), além de aplicar o método quantitativo de padronização externa para determinar o teor de cafeína.

2) Resultados e Discussões

• Preparo dos Padrões:

1. TC 50

A partir do padrão TC 100 previamente preparado, procedemos da seguinte maneira para a elaboração do TC 50:

CV = CV

100.5=C.10

C = 50 µg/mL

1. TC 20

A partir do padrão TC 50, os seguintes cálculos foram feitos para determinarmos a quantidade de volume necessária para elaborar os padrões:

CV = CV

50.V = 10.20

V= 4mL de padrão TC 50.

1. TC 10

A partir do padrão TC 20, os seguintes cálculos foram feitos para determinarmos a quantidade de volume necessária para elaborar os padrões:

CV = CV

20.V = 10.10

V= 5mL de padrão TC 20.

1. TC 5

A partir do padrão TC 10, os seguintes cálculos foram feitos para determinarmos a quantidade de volume necessária para elaborar os padrões:

CV = CV

10.V = 10.5

V = 5mL de padrão TC 10.

1. TC 2

A partir do padrão TC 5, os seguintes cálculos foram feitos para determinarmos a quantidade de volume necessária para elaborar os padrões:

CV = CV

5.V = 2.10

V= 4mL de padrão TC 5.

• Tabela Curva de Calibração

Massa de amostra pesada: 0,2117g

	Área Teobromina	Área Cafeína
Branco
TC 50	3534903	3469884
TC 20	1394871	1364432
TC 10	733660	717881
TC 5	341581	330119
TC 2	181949	178297
Amostra	-	407185

TR Teobromina: 1,008

TR Cafeína: 1,432

• Equação das Curvas de Calibração

I) Teobromina

f(x) = 70220,3005543823x + 15559,5703637487

r² = 0,9996983785

II) Cafeína

f(x) = 68977,1467793031x + 11920,2460401267

r² = 0,9996400653

• Cálculo do teor de cafeína na amostra:

407185 = 68977,1467793031x+11920,2460401267

395264,7539598733 = 68977,146779301x

x = 5,730 mg/L

FD: 5X

5,730.5= 28,65 mg/L

• Massa de cafeína no balão volumétrico

28,65mg_____________1000ml

    x_________________100ml

    x = 2,865mg de cafeína no balão volumétrico de 100mL

• Em p/p%

2,865   (100) = 1,353% de cafeína

0,2117(1000)

...