Lei de Beer

Introdução

Os métodos cromatográficos são de dois tipos básicos. Na cromatografia em coluna, a fase estacionária é mantida em um tubo estreito e a fase móvel, forçada através do tubo sob pressão ou por gravidade. Na cromatografia planar, a fase estacionária é suportada sobre uma placa plana ou nos poros de um papel. Nesse caso, a fase móvel desloca-se através da fase estacionária por ação da capilaridade ou sob a influência da gravidade. Abordaremos aqui somente a cromatografia em coluna.

Em um exemplo com dois componentes de uma amostra, A e B, são resolvidos por eluição em uma coluna recheada. A coluna consiste em um tubo estreito recheado com um sólido inerte finamente dividido que retém a fase estacionária na sua superfície. A fase móvel ocupa os espaços entre as partículas do recheio. Inicialmente, a solução da amostra contendo a mistura de A e B na fase móvel é introduzida na cabeça da coluna como uma zona estreita no tempo t0. Os dois componentes distribuem-se entre a fase móvel e a fase estacionária. A eluição ocorre forçando os componentes da amostra através da coluna, introduzindo-se a fase móvel continuamente.

Com a primeira introdução da fase móvel nova, o eluente – a porção da amostra contida na fase móvel – desloca-se através da coluna, e uma partição adicional entre a fase móvel recém-introduzida e a fase estacionária vai ocorrer (tempo t1). A partição entre a fase nova recém-introduzida e a fase estacionária ocorre simultaneamente no local da amostra original.

Outras adições do solvente transportam as moléculas do soluto através da coluna em uma série contínua de transferências entre as duas fases. Em virtude do fato de que o movimento do soluto pode ocorrer somente na fase móvel, a velocidade média com a qual o soluto migra depende da fração de tempo que permanece nessa fase. Essa fração é pequena para os solutos que são fortemente retidos pela fase estacionária e maior quando a retenção na fase móvel for mais provável (componente A). Idealmente, as diferenças resultantes nas velocidades levam os componentes da mistura a se separar em bandas ou zonas ao longo do comprimento da coluna. O isolamento das espécies separadas pode ser conseguido passando-se uma quantidade suficiente de fase móvel através da coluna de forma a transportar as bandas individuais para além do final da coluna (para ser eluídas da coluna), onde elas possam ser coletadas ou detectadas.

Objetivo

Observar a separação de pigmentos, em uma coluna cromatográfica, identificando-os.

Materiais e Procedimento

3.1 Materiais

Bureta

Berquer

Algodão

Suporte universal

Garra

Conta-gotas

CaCO3

Álcool

Anilina preta

3.2 Procedimento

Foi colocado um pedaço de algodão dentro da bureta que servirá de coluna

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