Os Polifenois Totais

Determinação de polifenóis totais

A determinação do conteúdo total de compostos fenólicos presentes nas amostras de suco de uva será realizado pelo método espectrofotométrico de Folin-Ciocalteau descrito por Singleton & Rossi (1965). Em balão volumétrico será adicionado 20 mL da amostra com 500 µL do reagente Folin-Ciocalteau (Sigma) e 6 mL de água destilada, sendo seguida por agitação e incubação à temperatura ambiente. Após será adicionado solução de carbonato de sódio 15% completado com água e deixado em repouso em local escuro por 2 horas à temperatura ambiente. A absorbância será determinada a 765 nm (LIMA, 2015; SILVA, 2019). Solução de ácido gálico será usado para construção da curva de calibração com concentração variando de 0,01 a 1000 mg/L (R2¼0.99) e expressos em mg de ácido gálico equivalentes por L de suco de uva.

Determinação de antocianinas monoméricas totais

O conteúdo de antocianinas monoméricas totais será determinado pelo método da diferença de pH de acordo com Lee et al. (2005), em que se dilui a amostra de suco de uva em dois sistemas-tampão: cloreto de potássio pH 1,0 (0,025 mol L-1 ) e acetato de sódio pH 4,5 (0,4 mol L-1 ). As amostras serão diluídas na proporção 1:20 da correspondente solução tampão (pH 1,0 ou pH 4,5) e a absorbância será medida em espectrofotômetro no intervalo de comprimento de onda de 520 nm e 700 nm, respectivamente (LIMA, 2015), sendo calculada conforme equação 7.

A=(A510nm-A700nm)pH 1,0-(A510nm-A700nm)pH 4,5 (7)

A concentração de antocianinas monoméricas totais será calculada por meio da Lei de Lambert-Beer, conforme equação 8.

MA =A M FD 1000 L (8)

Onde:

A =absorbância calculada na equação XX

M = massa molecular de cianidina-3-glucosídeo

FD = fator de diluição (20),

= coeficiente de extinção molar (26900L.mol-1 cm-1)

L =comprimento do caminho óptico da cubeta (1cm).

Os resultados serão expressos em equivalentes de cianidina-3-glucosídeo (449,2 g mol-1) por 100 g de suco de uva seco (?) como a principal antocianina monomérica em V.labrusca L. (absortividade molar de 37.000 L / cm / mol e massa molecular de 724,5 g / mol).