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A fotocolorimetria é um método biofísico de análise de substâncias largamente

utilizado em laboratórios de análises clínicas e em laboratórios de pesquisa,

tendo como principal objetivo a determinação da concentração de soluções. Esse

método baseia-se na relação existente entre a absorção de radiações

eletromagnéticas e a concentração da substância em questão. Lambert e Beer

demonstraram que existe uma relação direta e exponencial entre a concentração

de uma solução e a luz por ela absorvida. Observaram que a luz emergente é

também dependente do percurso óptico. O equipamento utilizado para a

realização da prática de fotocolorimetria, o fotocolorímetro, é composto pelos

seguintes itens: fonte de luz, filtro, cubeta, fotocélula e miliamperímetro. O

aspecto externo do fotocolorímetro é bastante característico e composto por:

seletor de filtro, que serve para a escolha do comprimento de onda do feixe de

luz que incidirá sobre a cubeta, sendo o aparelho dotado de cinco filtros (410nm,

480nm,520nm,580nm e 660nm); porta-cubetas, que é o local onde se coloca a

cubeta;botões de calibração; mostrador de leitura, que apresenta as duas

grandezas que podem ser medidas pelo fotocolorímetro: a absorbância e a

transmitância. A transmitância expressa a quantidade de luz que se transmite

através de uma solução. A absorbância expressa a capacidade que tem uma

solução de absorver uma certa quantidade de energia do feixe de luz incidente. O

procedimento prático tem como objetivo a determinação da concentração de uma

solução de anilina utilizado o método fotocolorimétrico. São preparadas cinco

soluções de anilina, com diferentes concentrações, fazendo-se uma diluição

seriada com razão dois.A partir daí, escolhe-se uma das soluções e mede-se a

absorbância em cada um dos cinco comprimentos de onda disponíveis. A partir

dos dados obtidos constrói-se o Espectro de Absorção , que vai fornecer o

fotopico (comprimento de onda correspondente ao valor de absorbância mais

elevado) que será utilizado para a construção da Curva Padrão. Para isso, fixa-se

o fotopico e mede-se as absorbâncias das cinco soluções preparadas

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