O RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA DE MICROBIOLOGIA

INSTITUTO ISRAELITA DE ENSINO E PESQUISA ALBERT EINSTEIN

RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA DE MICROBIOLOGIA

COLORAÇÃO DE GRAM E ZIEHL NEELSEN

SÃO PAULO

2021

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SUMÁRIO

1   Introdução        

2   objetivo        

3   Material e Método        

3.1  MATERIAIS UTILIZADOS        

3.2  MÉTODOS UTILIZADOS        4

3        RESULTADOS OBTIDOS        4

4        CONCLUSÕES        6

5        REFERêNCIAS        7

        

1 INTRODUÇÃO

A extensa variedade de espécies bacterianas pode ser isolada nas amostras biológicas com o objetivo de identificar o agente etiológico de uma infecção. Uma das principais formas consiste na análise das suas características morfológicas, (forma, arranjos, grupamento das células e sua afinidade por corantes). Para o exame bacteriológico direto, existem diversos métodos de coloração que podem ser utilizados no laboratório de microbiologia clínica como o método de Ziehl-Neelsen e o método de coloração de Gram.

A coloração de Gram é uma técnica utilizada para a diferenciar microorganismos com diferentes estruturas de parede celular a partir da coloração que adquirem após o tratamento com agentes químicos, as diferenças das estruturas da parede celular bacteriana, principalmente a espessura da cama de peptideoglicano, será responsável pelo diferente comportamento das bactérias diante da coloração de Gram. Através da coloração de Gram, diferenciam-se as bactérias Gram-positivas das Gram-negativas.

A coloração de Ziehl-Neelsen baseia-se na capacidade de algumas bactérias (Mycobacterium tuberculosis e Mycobacterium leprae), resistirem aos métodos comuns de coloração, a técnica é mais agressiva que a de Gram. As bactérias que após realizados todo o método de Ziehl-Neelsen possuírem a coloração rosa derivada da fucsina fenicada chamamos de bactérias ácido-álcool resistente (BAAR). Essa característica é devido ao elevado teor de lipídios estruturais (cerca de 60%), na parede celular destas bactérias que provoca uma hidrofobicidade, dificultando a ação dos mordentes e corantes aquosos.

2 OBJETIVOS

Treinar a confecção e coloração de lâminas baseando-se nos métodos de coloração de Gram e coloração de Ziehl-Neelsen, observando as lâminas no microscópio para identificação de possíveis bactérias e diferenciá-las de acordo com suas características.

3 MATERIAIS E MÉTODOS

3.1 MATERIAL UTILIZADO

• 2 lâminas
• 2 swabs
• Água
• Álcool 70%
• Álcool ácido
• Azul de metileno
• Bancada
• Bico de Bunsen
• Cristal Violeta
• Esfregaço mucosa da boca  
• Fucsina
• Fucsina fenicada
• Jaleco
• Lápis
• Lugol
• Luvas
• Microscópio
• Papel toalha

3.2 MÈTODOS

Com o auxílio de swabs foi feito esfregaço na mucosa da boca e o material foi inserido nas duas lâminas com movimentos circulares, seguindo a orientação da professora Renata. Posteriormente foi feito a identificação das lâminas com o nome do método de coloração a ser realizado. Iniciamos com o método de coloração de Ziehl-Neelsen, cobrindo a lâmina com fucsina fenicada e esquentamos no bico de Bunsen até o corante evaporar. Lavou-se com água corrente para retirar o excesso de corante. Descorou-se com álcool-ácido por 20 segundos. Lavou-se com água corrente, cobriu-se a lâmina com azul de metileno por 30 segundos. Lavou-se com água corrente e secou-se naturalmente. Na coloração pelo método de Gram cobriu-se a lâmina com cristal violeta por 60 segundos. Lavou-se com água corrente. Cobriu-se com lugol por 60 segundos. Lavou-se a lâmina com água corrente. Cobriu-se a lâmina com descorante por 20 segundos. Cobriu-se com fucsina por 20 segundos. Lavou-se com água corrente e secou-se naturalmente.