TÉCNICAS MICROBIOLÓGICAS BÁSICAS

INTRODUÇÃO

Estágio realizado em 19 de agosto de 2014, com supervisão da Professora Pamella Fernanda com o auxilio da Professora Raquel Medeiros, com o objetivo de passar as técnicas básicas para uma boa performance no laboratório de Microbiologia Clinica. Informações como colocação, coloração de Gram e seus princípios, material utilizado, controle de qualidade da coloração. A aula foi produtiva pois nela tivemos a oportunidade de aprender a preparar desde a coleta do material da secreção de orofaringe, até a coloração e analise em microscópio óptico .

3

ATIVIDADES DESENVOLVIDAS

Inicialmente a Professora Pamella falou sobre coloração de Gram, que é uma técnica de coloração para diferenciação de microorganismos através das cores, como comparar a estrutura da parede celular das bactérias Gram positivas e Gram negativas. Permiti observar e obter informações a respeito do comportamento do seu material celular diante dos corantes de Gram.

MATÉRIAL ULTILIZADO:

1. Lâmina

2. Cristal Violeta

3. Lugol

4. Álcool Acetona

1. Fuscina de Gram

PREPARO DO ESFREGAÇO:

A- Pegar uma lâmina limpa, seca, desengordurada e estéril.

B- Identificar o lado da lâmina onde será feito o esfregaço.

C- Com um Swab contendo o material coletado a partir da secreção orofaringe, fazer movimentos circulares a ovalados sob a superfície da lâmina, para obter um esfregaço bem firme e uniforme.

D- Fixar o esfregaço passando a lâmina ( lado oposto ao do esfregaço ) 5 vezes sobre a chama do bico de Bunsen (rapidamente).

PROCEDIMENTO:

1. Cobre-se o esfregaço durante 1 minuto cronometrado com Cristal Violeta.

2. Lava-se cuidadosamente em água corrente pela lateral da lâmina, sem deixar com que a água caia diretamente na lâmina para não haver perda do material.

3. Cobre-se o esfregaço durante 1 minuto cronometrado com lugol, que irá funcionar como mordente.

4. Lava-se novamente delicadamente com água corrente, pela lateral da lâmina.

5. Decora rapidamente com solução álcool-acetona.

6. Lava-se novamente delicadamente com água corrente, pela lateral da lâmina.

4

7. Cobre-se o esfregaço com Fuscina de Gram por 30 minutos cronometrados.

8. Lava-se novamente delicadamente com água corrente, pela lateral da lâmina.

9. Deixa secar e observa-se em microscópio óptico.

RESULTADO:

Os resultados após coloração de Gram permitem classificar as bactérias em dois grupos:

Bactérias Gram positivas: Roxo

Bactérias Gram