Microbiologia Utilização de equipamentos

UNIVERSIDADE FEDERAL DO TOCANTINS

ENGENHARIA DE BIOPROCESSOS E BIOTECNOLOGIA/QUÍMICA AMBIENTAL

Disciplina: Microbiologia Geral

Prof. Dr. Alex Fernando de Almeida

Aula Prática 2: Equipamentos e Material do Laboratório de Microbiologia

1) OBJETIVOS

        Reconhecer materiais e equipamentos utilizados no laboratório de microbiologia. Preparar vidraria para a esterilização. Averiguar a presença de micro-organismos no ambiente.

2) PROCEDIMENTOS

        2.1 RECONHECIMENTO DE MATERIAL E EQUIPAMENTOS

        Vidraria e Utensílios

        Alça de Drigalski e platina

Bico de Bunsen

Pipeta automática

Pipeta de vidro graduada

Placa de Petri

Tubo de cultura

Tubo de ensaio

Lâmina

Lamínula

Balão volumétrico

Bastão de vidro

Equipamentos

Agitador

Autoclave

Câmara de segurança biológica

Centrífuga

Espectrofotômetro

Incubadora ou BOD

Microscópio

Liofilizador

Reagentes e Meios de Cultura

Ágar nutriente

Agar extrato de malte

Peptona

Extrato de levedura

Glicose

2.2 PREPARO DE VIDRARIA PARA ESTERILIZAÇÃO

Preparo de vidraria para esterilização

Tubos, Balões e outros frascos

Devem ser embuchados em algodão hidrofóbico. A rolha de algodão deve ser suficientemente, mas não demasiadamente, apertada, e quando bem-feita não se desfaz ao ser retirada do tubo. Recomenda-se colocar sobre os tampões de algodão pequenos cartuchos de papel para a esterilização. Pode-se usar cápsulas de alumínio, em vez de algodão, de manipulação mais fácil e, sobretudo úteis para a cultura em tubos de ensaio.

Placas de Petri

As tampas devem ser munidas de um disco de papel-filtro. Deve-se traçar com a tampa da placa um círculo sobre o papel-filtro, cortá-lo, aplica-lo contra a face interna da tampa e ajustá-lo bem. As placas deverão ser envolvidas em papel ou colocados em recipientes apropriados para a esterilização.

Pipetas

Deve-se provê-las de algodão na extremidade destinada à aspiração e deixa-las envoltas em papel, colocadas em recipientes adequados, como cilindros metálicos.

Esterilização da vidraria

A vidraria seca será esterilizada em estufa de secagem e esterilização a uma temperatura entre 170 e 180 oC, durante duas hora. A esterilização se dá por calor seco.

3.3 AVERIGUAÇÃO DA PRESENÇA DE MICRO-ORGANISMOS NO AMBIENTE

Material

Ágar nutriente

Extrato de Levedura        2,00 g

Extrato de carne        1,00 g

Peptona                5,00 g

Cloreto de Sódio         5,00 g

Agar                        15,00g

Água destilada                1,0 L        

Ágar Extrato de Malte

Extrato de malte        20,0 g

Peptona                1,0 g

Glicose                        20,0 g

Agar                        20,0 g

Água destilada                1,0 L        

Autoclavar a 121 ºC por 20 minutos; pH final = 5,0 – 5,5

Procedimento

Exponha as placas de Petri com a uma condição de inoculação:

- Ar: expor uma das placas durante 15 min ao ar.

- Pele ou Cabelo: tocar suavemente a extremidade dos dedos na superfície do ágar ou depositar alguns fios de cabelo sobre o ágar.