Relatorio de aula pratica - VDRL
Por: Raislany Amaro • 4/7/2015 • Relatório de pesquisa • 673 Palavras (3 Páginas) • 6.567 Visualizações
- INTRODUÇÃO
- OBJETIVO
Realizar o teste de VDRL para determinação qualitativa e quantitativa de anticorpos em amostra de soro humano.
- PARTE EXPERIMENTAL
3.1. MATERIAIS E REAGENTES
- 2 Amostra de soro (amostra 1 positiva e amostra 2 negativa);
- Lâmina de vidro plana;
- Tubos de ensaio para diluição e titulação;
- Solução salina a 0,9%;
- Suspensão antigênica;
- Luva de procedimento;
- Pipeta;
- Microscópio;
3.2. PROCEDIMENTOS
DETERMINAÇÃO QUALITATIVA – VDRL
Primeiramente antes do uso deixou-se os reagentes atingirem a temperatura ambiente.
Pipetou-se 50µl da amostra de soro 1 em uma delimitação da lâmina.
Em seguida, pipetou-se 45µl de salina (NaCl a 0,9%) e 5µl da mesma amostra de soro 1 em uma outra delimitação da lâmina, amostra diluída 1/10.
O mesmo se fez para a amostra 2, conforme a figura abaixo.
[pic 1]
Figura 1: Esquema de diluição das amostras.
Em seguida, homogeneizou-se a suspensão antigênica no frasco conta gotas cuidadosamente através de movimentos suaves de inversão e adicionou-se uma gota da suspensão em cada delimitação da lâmina contendo amostra.
Agitou-se a lâmina com movimentos circulares por 4 minutos.
Após a agitação, analisou-se os resultados no microscópio em aumento de 100x.
[pic 2]
Figura 2: lâmina contendo as amostras sendo analisada no microscópio.
DETERMINAÇÃO QUANTITATIVA – VDRL
Para analisar a amostra de soro reagente no teste qualitativo, pipetou-se 50µl de salina nas delimitações 6 a 12 da lâmina.
Em seguida, pipetou-se 50µl da amostra de soro reagente nas delimitações 5 e 6 da lâmina e homogeneizou.
Transferiu-se 50µl da delimitação 6 para a 7 e homogeneizou.
Procedeu-se da mesma maneira até a delimitação 12, conforme mostra a figura 3. Posteriormente desprezou-se 50µl da delimitação 12. Assim realizou-se uma diluição seriada de 1/2, 1/4, ... até 1/128
[pic 3]
Figura 3: esquema da diluição.
Em seguida, homogeneizou-se a suspensão antigênica no frasco conta gotas cuidadosamente através de movimentos suaves de inversão e adicionou-se uma gota da suspensão em cada delimitação da lâmina contendo a amostra.
Agitou-se a lamina em movimentos circulares por 4 minutos.
Após a agitação, analisou-se os resultados no microscópio em aumento de 100x.
- RESULTADOS E DISCUSSÃO
DETERMINAÇÃO QUALITATIVA – VDRL
No teste sorológico não treponêmico da Sífilis, o método qualitativo visa pesquisar a presença dos anticorpos inespecíficos na amostra, pela adição da suspensão antigênica no soro diluído e não diluído. A presença de grumos de aglutinação entre os antígenos e os anticorpos do paciente é considerado resultado positivo, pois indica que o paciente já esteve ou está em um quadro de infecção da sífilis. Depois, recorre-se à diluição do soro para confirmação do resultado pelo método quantitativo.
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