Bioquimica
Por: nando2016 • 27/10/2015 • Artigo • 642 Palavras (3 Páginas) • 520 Visualizações
Luminescência/Espectrofotometria de Fluorescência molecular
Entre os fenômenos de luminescência estão incluídas a eletroluminescência, a
quimiluminescência e a fotoluminescência. A luminescência é definida como a emissão
de luz na faixa do ultravioleta/Visível UV/Vis (200 – 800 nm) do espectro
eletromagnético como resultado de uma transição eletrônica.
A luminescência é um processo fotoquímico ou fotofísico, envolve a absorção de
um fóton (energia) por uma molécula e, consequentemente, produz um estado
eletrônico excitado. Isto significa dizer que a molécula absorveu uma quantidade
discreta de energia, suficiente para promover um elétron de um nível inferior de
energia para um nível superior de energia. A molécula foi promovida do estado
fundamental para o estado excitado. A molécula não pode permanecer indefinidamente
no estado excitado, por ser termodinamicamente instável em comparação com estado
fundamental, e pode dissipar a energia absorvida através dos processos de
fluorescência e fosforescência (emite radiação). A fotoluminescência é o nome do
fenômeno que engloba a fluorescência e a fosforescência.
Fluorescência - emissão de um fóton de luz por uma molécula que atingiu o
estado excitado pela absorção da radiação eletromagnética e retornou ao estado
fundamental. É característico da fluorescência que a emissão do fóton cesse quando a
radiação responsável pela excitação é retirada. A emissão ocorre imediatamente após
a excitação (emissão instantânea), o que indica que a transições de energia envolvidas
não provocam mudanças no spin do elétron. É dito transição no estado singleto como
mostra a Figura 1b.
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Fosforescência - neste caso também a excitação é provocada por radiação
eletromagnética, mas o spin do elétron excitado ao retornar ao estado fundamental
passa por um processo de inversão do spin, onde ocorre à transição do estado singleto
para o estado tripleto, Figura 1c. O processo de fosforescência pode durar horas, a
emissão da radiação continua após a excitação ter cessado.
Figura 1 – Estado do spin eletrônica das moléculas (a) estado fundamental, (b) estado singleto
e (c) estado tripleto.
Para que um composto orgânico apresente fluorescência, deve conter uma
estrutura com duplas conjugadas, apresente rigidez e de preferência moléculas
grandes (multicíclicas). Podem estar presentes os heteroátomos na conjugação.
Heteroátomo é um átomo presente na cadeia carbônica diferente do átomo de
carbono e do hidrogênio. Por exemplo, o elemento químico oxigênio (O) presente na
fluoresceína.
Exemplos clássicos de moléculas que fluoresce e não fluoresce:
HO O
COOH
HO O O
COOH
Fenolftaleína (não fluorescente) Fluoresceína (fluorescente)
Compostos não fluorescentes podem, muitas vezes, ser derivados quimicamente
e tornar fluorescentes com um reagente fluorogênico (Ex.: fluorescamina)
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