Antibiograma in vitro

AULA PRÁTICA 7: ANTIBIOGRAMA “IN VITRO”

OBJETIVOS

O objetivo desta prática foi de analisar através do método de difusão a resistência de Staphylococcus aureus a alguns antibióticos.

MATERIAL

• “Swab” esterelizado;

• Cultura líquida fresca de Staphylococcus aureus;

• Placa de Petri, com meio Mueller-Hinton sólido;

• Discos de papel com antibióticos: ERI - Eritromicina, CAZ 30 – Ceftazidima e OXA 01 – Oxacilina;

• Pinças;

• Régua.

MÉTODOS

• Inicialmente, introduzimos na cultura de Staphylococcus aureus um “swab” esterelizado e retiramos o excesso de líquido comprimindo a ponta do “swab” nas paredes do tubo;

• Espalhamos o conteúdo do “swab” sobre o meio de cultura sólido distribuindo numa placa de Petri (meio Mueller-Hinton). Espalhamos bem, inicialmente na horizontal e posteriormente na vertical, obtendo um “tapete” de bactérias, preenchendo todos os espaços na superfície do meio sólido;

• Esperamos a cultura sobre o agar secar bem, durante 2 minutos;

• Com o auxílio de uma pinça, colocamos três discos de papel contendo diferentes antibióticos sobre a cultura seca, espalhados com alguns centímetros de distância, sendo eles: ERI - Eritromicina, CAZ 30 – Ceftazidima e OXA 01 – Oxacilina;

• As placas foram incubadas em estufa a 37ºC, entre 16 a 24 horas.

Após a retirada da estufa, medimos em milímetros os halos formados ao redor dos discos de papel e registramos os dados obtidos a fim de relacioná-los com os dados da tabela a seguir:

SIGLA NOME RESISTENTE INTERMEDIÁRIO SENSÍVEL

ERI 15 Eritromicina ≤ 14 15 - 16 ≥ 17

CAZ 30 Ceftazidima ≤ 14 15 - 17 ≥ 18

OXA 01 Oxacilina ≤ 17 - ≥ 18

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Os dados obtidos a partir da análise dos halos formados aos redor dos discos de papel foram os seguintes:

SIGLA MEDIDA (mm)

ERI 15 32

CAZ 30 15

OXA 01 20

Ao analisar a placa de Petri que manuseamos, foi possível perceber a discrepância dos halos formados em torno dos discos de antibióticos. O maior halo encontrado, como demonstrado na tabela já exibida, foi ao redor do disco ERI 15, correspondente ao antibiótico Eritromicina.

A formação de um halo transparente sobre a superfície do meio, ao redor de um disco de antibiótico, indica uma região com ausência de crescimento bacteriano, ou seja, revela a ação inibitória do agente antimicrobiano sobre a bactéria ensaiada. Sendo assim, a maior inibição se deu, respectivamente, em Eritromicina, Oxacilina e Ceftazidima.

A classificação