Relatório de Aula Prática Coloração de Lâmina de Exame Papanicolau

Relatório de aula prática

Coloração de Lâmina de exame Papanicolau

Profª Thais Cavacchio

Cristiane Rodrigues de Souza RA 8500529561

Julio Cesar Silva Santos RA 5410739173

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1. materiais, composição dos corantes e método

1. Materiais

• Lamina citológica
• Álcool 30%
• Álcool 70%
• Álcool 95%
• Álcool Absoluto
• Água destilada
• Bálsamo
• Corante Hematoxilina de Harris
• Corante Orange G
• Corante EA 36
• Fixador citológico (Carbowax)
• Microscópio óptico Nikkon. Objetiva em 10X
• Xilol

1. Composição dos corantes

Orange G: Orange G: 5 g/L; Ácido fosfotungstico: 0,15 g/L; Água purificada: 100 mL/L; Álcool etílico a 96º: 900 mL/L.

EA 36: Eosina Amarelada: 2,5 g/L; Verde Claro Amarelado: 2,5 g/L; Marrom de Bismarck: 0,5 g/L; Ácido fosfotúngstico: 2 g/L; Solução Saturada de Carbonato de Lítio: 0,5 mL/L; Água deionizada: 100 mL; Ácido Acético: 1 mL/L; Álcool etílico a 95º q.s.p. 1000 mL.

Hematoxilina de Harris: Hematoxilina: 5,1 g/L; Álcool etílico a 96º: 50 mL/L; Sulfato Alúmen de potássio: 100 g/L; Óxido amarelo de mercúrio: 2,5 g/L; Ácido Acético: 4 mL/L; Água purificada: 1000 mL.

1. Método

A amostra foi coletada à partir de um raspado da mucosa da cavidade bucal por conta da sua similaridade com a mucosa vaginal.

O raspado foi feito com uma espátula de Ayre feita de madeira, e aplicado na lamina citológica, em seguida foi aplicado o fixador citológico (Carbowax).

As etapas da coloração seguiram o seguinte protocolo (Coloração de Papanicolau modificada):

• Lamina fixada – remover o fixador com álcool por 2 minutos;
• Hidratação – Álcool 70%, 30%, água destilada – 8 mergulhos;
• Coloração do núcleo – corante hematoxilina de Harris por 1 minuto e 10 segundos;
• Água corrente por 20 segundos
• Desidratação – Álcool 30%, 70%, 95% - 8 mergulhos;
• Coloração das hemácias e queratina – Corante Orange G 1 minuto e 30 segundos
• Álcool 95% - 8 mergulhos
• Álcool 95% - 8 mergulhos
• Coloração do Citoplasma – Corante EA 36 – 1 minuto e 20 segundos
• Álcool 95% - 8 mergulhos
• Álcool 95% - 8 mergulhos
• Álcool Absoluto – 8 mergulhos
• Álcool/ xilol – 8 Mergulhos
• Xilol – 8 mergulhos
• Montagem da lamina com balsamo ou verniz.

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1. resultado

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