Aula Prática: Dosagem de colesterol e triglicerídeos

[pic 1]

Universidade Estácio de Sá – Campus João Uchôa

Faculdade de Medicina

Bases Moleculares dos Sistemas Orgânicos

Aula prática: Dosagem de colesterol e triglicerídeos

Discentes: Nilson Junior, Pedro Henrique, Maitê Ferreira, Maria Gabriela Pimenta, Paula Paraguassu e Polliana

Maio- 2019

Rio de Janeiro

INTRODUÇÃO

Os esteróis são lipídeos estruturais presentes nas membranas da maioria das células eucarióticas. O colesterol, o principal esterol nos tecidos animais, é anfipático, com um grupo cabeça polar (o grupo hidroxila) e um “corpo” hidrocarbonado apolar (o núcleo esteroide e a cadeia lateral hidrocarbonada). Além de seus papéis como constituintes de membrana, os esteróis servem como precursores para uma diversidade de produtos com atividades biológicas específicas. Os hormônios esteroides, por exemplo, são sinalizadores biológicos potentes que regulam a expressão gênica. Os ácidos biliares são derivados polares do colesterol que atuam como detergentes no intestino, emulsificando as gorduras da dieta para torná-las mais acessíveis às lipases digestivas.

Os triacilgliceróis são ésteres de ácidos graxos do glicerol. Os lipídeos mais simples construídos a partir de ácidos graxos são os triacilgliceróis, também chamados de triglicerídeos, gorduras ou gorduras neutras. Os triacilgliceróis são compostos por três ácidos graxos, cada um em ligação éster com uma molécula de glicerol. Aqueles que contêm o mesmo tipo de ácido graxo em todas as três posições são chamados de triacilgliceróis simples, e sua nomenclatura é derivada do ácido graxo que contêm. Os triacilgliceróis simples de 16:0, 18:0 e 18:1, por exemplo, são tripalmitina, triestearina e trioleína, respectivamente. A maioria dos triacilgliceróis de ocorrência natural é mista, pois contém dois ou três ácidos graxos diferentes. Os triacilgliceróis são moléculas apolares, hidrofóbicas, essencialmente insolúveis em água.

OBJETIVO

Este trabalho teve objetivo de realizar o teste enzimático colorimétrico para a dosagem de triglicérides no soro ou plasma usando reagente líquido pronto para uso. A dosagem do colesterol no sangue, juntamente com a de triglicérides é empregada principalmente na avaliação de risco de doença arterial coronariana e no monitoramento de pacientes com distúrbios no metabolismo dos lipídeos. Neste trabalho analisaremos a concentração dos substratos por meio de dosagens bioquímicas, analisando a coloração dos tubos após a reação ter sido realizada.

MATERIAIS UTILIZADOS

Kit para dosagem colesterol e triglicérides;

Amostra de soro;

Espectrofotômetro;

Tubos de ensaio;

Pipetas ;

Banho Maria (37 ºC)

Luva látex;

[pic 2]

[pic 3]   

PROCEDIMENTOS

• Deixar reagentes e amostra adquirirem temperatura ambiente
• Ajustar o espectrofotômetro para 520 nm.
• Identificar 3 tubos: B(branco), P (Padrão), T (teste)
• Agitar e incubar em banho- maria a 37°C por 5 min.
• Fazer as leituras das amostras dos tubos B, P, T, acertando o zero com o branco.
• Efetuar os cálculos.

Tubos	Branco	Teste	Padrão
Amostra	-	20µL	-
Padrão	-	-	20µL
Reagente de cor	2mL	2mL	2mL

Homogeneizar  suavemente a mistura dentro de cada tubo de ensaio e incubar em banho-maria a 37ºC  por 5 minutos. Após esse período realizar as leituras no espectrofotômetro a 520 nm, onde o feixe de luz absorve a cor e da leitura. Acertar o zero com o tubo Branco. Anotar os valores dos Tubos Teste e Padrão.

RESULTADOS DA ANÁLISE DE COLESTEROL

Obtivemos os seguintes valores nos tubos:

Tubo teste = 332

Tubo padrão = 321

• Utilizamos o cálculo:

Triglicerídeos mg/dl = absorbância teste / absorbância padrão X 200

Obtivemos o resultado : 207 mg/dL

[pic 4][pic 5]                             

VALORES DE REFERÊNCIAS:

Idade	Risco Moderado	Risco Alto
20-29	>200 mg/dL	>220 mg/dL
30-39	>220 mg/dL	>240 mg/dL
>40	>240 mg/dL	>260 mg/dL

RESULTADOS DA ANÁLISE DE TRIGLICERÍDEOS

Obtivemos os seguintes valores dos tubos:

Tubo teste = 156

Tubo padrão = 414

• Utilizamos o cálculo:

Triglicerídeos mg/dl = absorbância teste / absorbância padrão X 200

...