PCR Proteina C Reativa

Introdução

A proteína C-reativa (PCR) é uma proteína produzida pelo fígado e está presente em pequenas quantidades no plasma de pessoas hígidas. No entanto, sua concentração circulante pode aumentar drasticamente em uma resposta mediada por processos inflamatórios e infecciosos.

Esta proteína é considera um indicador em atividade, quer seja de origem infecciosa ( pneumonia, tuberculose) ou não infecciosa( febre reumática, artrite reumatóide, lúpus eritematoso). Estão presentes também, em varias outras condições patológicas como no infarto agudo do miocárdio, doenças neoplásicas, trauma intenso, viroses, queimaduras.

No decorrer do processo inflamatório, o aumento da PCR verifica-se antes da elevação da velocidade hemossedimentação (VHS), posteriormente ambos mantêm-se elevados, e no processo de cura, a PCR retorna aos níveis de normalidade antes da VHS. A titulação das amostras positivas é de suma importância, uma vez que há correlação direta entre aumento de titulo e piora do quadro clinico. As amostras de baixos títulos podem indicar prematuramente alguns quadros infecciosos como os pós-operatórios.

OBJETIVO

Realizar a pesquisa da Proteína C Reativa em amostras, pela aglutinação, em teste qualitativo e sem-quantitativo.

EQUIPAMENTOS

 Técnica Manual

Lamina ou placa de fundo escuro;

Espátulas;

Pipetas para medir amostras e reagentes;

Cronômetros.

METODOLOGIA

O método fundamenta-se em uma reação de aglutinação de partículas de látex recobertas com gamaglobulina anti-PCR, especialmente tratadas para evitar aglutinações inespecíficas.

Prova qualitativa

Primeiramente, foi selecionado um soro para ser utilizado no teste. Em seguida em uma lamina de fundo escuro com três círculos, foram pipetados 25 ul de controle negativo no 1º circulo 25 ul de controle positivo no 2º circulo e 25 ul de soro e foi colocado em todos os três círculos 25 ul de látex PCR, homogeneanizando com auxilio de uma espátula utilizando toda a extensão de cada circulo da lâmina.

A lamina foi agitada por 2 minutos, e levada a luz para a leitura, na qual foi observados se houve ou não formação de grumos.

Prova semi Quantitativa

Primeiramente, o soro foi diluído, com auxilio de uma pipeta foram pipetados 40 ul de salina em todos os poços de uma placa. Em seguida, ao primeiro poço da fileira, foram adicionados 40 ul da amostra de soro. O conteúdo do poço foi então homogenizado e 40 ul dele foi passado para o poço seguinte, e assim sucessivamente, até serem obtidas as diluições 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32.

RESULTADOS

O resultado do teste qualitativo foi o seguinte: soro positivo com aglutinações visíveis. União de antígeno e anticorpo.

O resultado do teste semi quantitativo foi o seguinte: