Cinética do escurecimeno não-enzimático com soluções modelo de açúcares e aminoácidos em pH neutro e ácido

1. Objetivo

Usando o método da turbidimetria, tem-se o objetivo de acompanhar e observar p crescimento celular Saccharomyces serevisiae em meio sintético.

2. Materiais e Reagentes

- Erlenmeyer de 500 mL

- Rolhas de algodão cardado

- Tubo de ensaio

- Pesa filtro

- Pipetas estéreis de 1 e 2 mL

- Espectrofotômetro (570nm)

- Sacarose

- Sulfato de amônio

- Fosfato de potássio monobásico

- Sulfato de magnésio heptahidratado

- Extrato de levedura

- Fermento de panificação Saccharomycescerevisiae

3. Metodologia

Adicionou-se assepticamente fermento de panificação ao frasco erlenmeyer com 100Ml de meio sintético para determinação da curVa de crescimento, devidamente estéril , buscando obter uma concentração de 0,2g/100mL.

Após, oito tubos foram separados e numerados de 0 a 7 (número referente às horas) e, a partir do momento em que o meio foi inoculado e após cada hora corrida, foram retiradas amostras assepticamente, efetuando as devidas diluições e lendo-as no espectrofotômetro a 570nm. A tabela abaixo exemplifica o processo descrito:

Tempo	Hora	Diluição
0hr	14:00	1:4 (1ml amostra + 3ml H2O)
1hr	15:00	1:4 (1ml amostra + 3ml H2O)
2hrs	16:00	1:10 (1ml amostra + 9ml H2O)
3hrs	17:00	1:10 (1ml amostra + 9ml H2O)
4hrs	18:00	1:10(1ml amostra + 9ml H2O)
5hrs	19:00	1:10 (1ml amostra + 9ml H2O)
6hrs	20:00	1:20 (1ml amostra + 19ml H2O)
7hrs	21:00	1:20 (1ml amostra + 19ml H2O)

4.  Resultados e discussão:

Com a utilização do coeficiente angular da curva-padrão feita na pratica de quantificação celular(Y=34,3X + 0,044) foi calculada a concentração da levedura através da equação e em seguida multiplicado pelo fator de diluição (FD) empregado em cada leitura:

Tempo	Hora	Diluição	Volume de H2O concentrado	Absorbância	Concentração (Mg%)
0	14:00	1:4	3 mL	0,195	4,040x10^-3(x 4) = 0,017
1	15:00	1:4	3 mL	0,376	9,68x10^-3(x4) = 0,039
2	16:00	1:10	9 mL	0,349	8,89 x10^-3(x10) = 0,088
3	17:00	1:10	9 mL	0,532	0,014 x10= 0,142
4	18:00	1:10	9 mL	0,622	0,0168x10= 0,168
5	19:00	1:10	9 mL	0,727	0,019x10= 0,199
6	20:00	1:20	19 mL	0,395	0,010x20= 0,204
7	21:00	1:20	19 mL	0,466	0,012x20= 0,246