Eletroforese de Proteínas

Roteiro Aula Pratica

1- Titulo:

Eletroforese de Proteínas

2- Pesquisa:

A eletroforese de proteínas é de grande importância no diagnostico diferencial de algumas enfermidades e na avaliação da gravidade de altercações clinica. A eletroforese de proteínas é separação de substâncias eletricamente carregadas mediante a migração diferenciada delas quando as mesmas são dissolvidas em um eletrólito, através do qual é aplicada uma corrente elétrica. Essa técnica foi descoberta em 1937, pelo bioquímico sueco Arne Tisélius, que ganhou o Prêmio Nobel em 1948 por esse trabalho. A eletroforese de proteínas é o teste mais utilizado para investigação de anormalidades proteicas presentes no sangue.

3- Material Utilizado:

1- Soro

2- Placa de Petri

3- Fitas de gel agarose

4- Pinça

5- Corante (deixar as proteínas azuis)

6- Descorante (Acido Acético 5%)

7- Jato de Ar (secador)

8- Cronometro

4- Procedimentos:

1- Aplicar o soro nas canaletas verticais em frente ao numero da placa do gel de agarose com microcapilar.

2- Colocar o gel de agarose na cuba, coincidindo o lado (+) do gel com o (+) da cuba e o lado (-) do gel com o (-) da cuba.

3- Tampar a cuba, ligar e deixar por 30 minutos

4- Desligar a cuba

5- Retirar o gel de agarose da cuba

6- Mergulhar o gel, voltado para cima em 200ml de corante por 15 minutos

7- Retirar o gel de agarose com uma pinça do corante e coloca-lo sempre voltado para cima em 200 ml de acido acético a 5% com agitação por 2 minutos.

8- Retirar o excesso do acido do gel e passar o jato de ar para secar

9- Colocar o gel em banhos sucessivos de acido com agitação ate ficar transparente.

10- Secar com o jato de ar.

11- Proceder a Analise

5- Resultado:

• Imagem da Internet da eletroforese de albumina

As proteínas percorrem distâncias diferentes, formando bandas denominadas: albumina, alfa-1-globulina, alfa-2-globulina, betaglobulina e gamaglobulina.

E com isto fornece ao medico um importante auxílio no diagnóstico e acompanhamento de várias enfermidades.

6- Conclusão:

Concluímos que o método de eletroforese é baseado na habilidade de separação de moléculas, com base no tamanho, sob a influência de um campo elétrico. Em contraste, utilizam-se sucessivos campos elétricos alternados que forçam as moléculas a mudarem