Relatorio de aula pratica

Relatorio de Aula Pratica

Introdução

Iremos abordar o conteúdo da aula pratica de Bioquimica Metabolica, nela dosamos o colesterol  sanguínea de quatro alunos escolhidos aleatoriamente.

Nas aplicações espectrofotométricas, quando se usa energia monocromática (de uma só cor) em um simples comprimento de onda (λ), a fração de radiação absorvida pela solução, ignorando perdas por reflexão, será função da concentração da solução e da espessura da solução.

Objetivo

Treinar o manuseio básico do espectrofotômetro de feixe simples.

Observar a propriedade e a curva de absorção da dosagem de colesterol.

Determinar a concentração do colesterol em uma amostra sanguínea, para exemplificar a espectrofotometria molecular e a influência de alguns parâmetros nas análises.

Familiarização com a lei de Beer-Lambert e as relações de transmitância e absorbância.

Material utilizado

Béqueres

Pipeta volumétrica (10,00 mL);

Cubetas de plástico;

Centrifuga

Espectrofotômetro de feixe simples

Banho-Maria

Pipeta reguladora

Ponteiras descartaveis

Tubos de ensaio

Reagente Quantificador

Metodologia

Foi feito uma coletas de sangue periférico em quatro alunos aleatoriamente identificando os tubos como os nomes desses alunos, depois foi colocada as amostras em banho-maria a 37C por cinco minuto para acelerar a reação de coagulação sanguínea, após as amostras estarem coaguladas foram colocadas em um centrifuga com velocidade media de 1500 a 3000 RPM, depois de separada a parte solida da parte liquida “soro” identificamos outros tubos de ensaio numerados de ordem crescente.

Para a calibragem dos aparelho precisamos de dois tubos de ensaio extra enumerados com o branco que contem agua destilada para a calibração e com o padrão, o padrão serve para dar uma medida as amostra quantificadas.

É necessário que sejam seguidos alguns requisitos: de início, deve – se ajustar o comprimento de onda do espectrofotômetro em 490 λ, colocar a cubeta (B) no aparelho e ajustar o 0% de absorbância (esses parâmetros devem ser sempre conferidos e ajustados para novas medições). para diminuir os erros experimentais, e logo após ajustar o 0% de transmitância. Em seguida deve-se trocar a cubeta (B) pela cubeta (P), medir a absorbância (A)  que deve ser de 200 e calcular a transmitância (é necessário que sempre retornemos ao início dos requisitos para novas medidas). A partir dos requisitos supracitados, foi obtido o espectro de absorção da dosagem de colesterol, na faixa do visível, de 400 a 700 nm, sendo variado o comprimento de onda de 10 em 10 nm. Posteriormente, foram anotadas as medidas em absorbância (A)

Resultados

Calculo para a determinação dos resultados dos testes:

Fator

F= concentração do padrão/Absorbância padrão

F=200/0,124= 16212

F=16212

Valores de referencia:

<200mg/dL

Tabela de Resultado

Resultados	Absorbância x Fator	Mg/dL
Branco
Padrão	1612
Teste 1	0,237 x 1612	382
Teste 2	0,165 x 1612	265
Teste 3	0,155 x 1612	249
Teste 4	0,434 x 1612	699

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Curso: Bacharel em Farmácia

Mestre: Dênis Rômulo Leite Furtado

Componente Acadêmico: Bioquímica Metabólica

Componentes Curricular: Marcos Jardel Alves Silva

   

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