RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA PREPARO E APLICAÇÃO DO REATIVO DE BIURETO

           

           UNIVERSIDADE PRESIDENTE ANTÔNIO CARLOS – UNIPAC

Vanessa Araújo

Raiane Neves

Lays Almeida

Shayane Amaral

Vitor Luiz Moreno

                                      RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA

                    PREPARO E APLICAÇÃO DO REATIVO DE BIURETO

Relatório apresentado ao professor

Fernando Teixeira Gomes como requisito

                                                              parcial para a conclusão da disciplina

Bioquímica Aplicada, do curso de

Medicina Veterinária da Universidade

Presidente Antônio Carlos.

                                                   

                                                 Juiz de Fora

                                                        2019

1- Introdução:

Biureto é o nome dado à estrutura originada a partir da decomposição da ureia, quando essa é submetida a uma temperatura de, aproximadamente, 180oC. Soluções alcalinas que contenham biureto desenvolvem uma coloração violeta, quando em presença de sulfato de cobre (CUSO4). Esse fenômeno deve-se à formação de um complexo entre o íon Cu2+ e os átomos de nitrogênio presentes na molécula do biureto.

Se fizermos uma boa observação, veremos que as ligações existentes na molécula de biureto são muito parecidas com as ligações peptídicas estabelecidas entre os aminoácidos durante a formação de peptídeos e, finalmente, das proteínas. Observe o esquema abaixo, que representa a interação entre as ligações peptídicas de uma proteína ou peptídeo com íons Cu2+:

[pic 1]    Interação Biureto / Cu2+

Assim, a reação de peptídeos e proteínas com o sulfato de cobre recebeu o nome de Teste do Biureto, e é utilizada para pesquisa de ligações peptídicas.

[pic 2]

2- OBJETIVO:

Esta aula prática tem como objetivos a preparação pelo aluno do Reativo de Biureto e sua aplicação na identificação de ligações peptídicas.

3- MATERIAL E MÉTODOS:

a) Reagentes e soluções:

- Ureia	- Hidróxido de sódio 2N
- Sulfato cúprico 0,5%	- Hidróxido de sódio 10%
- Água destilada	- Albumina bovina 2%
- Solução de gelatina incolor sem sabor	- Solução de ovoalbumina 10%
- Reativo de Biureto

b) Materiais:

- Pipetas de 1mL, 2mL e 5mL	- Estante para tubos de ensaio
- 5 Tubos de ensaios	- Garra para tubo de ensaio
- Espátula	- Bico de Bunsen (chama)

c) Metodologia:

3.1. PREPARAÇÃO E UTILIZAÇÃO DO REATIVO

Etapa 1:

Em um tubo de ensaio limpo e seco, colocar uma pequena quantidade de ureia com a ponta da espátula. Aquecer o tubo diretamente na chama até a fusão completa da ureia e posterior formação de uma massa sólida no fundo do tubo. Observar a evaporação da amônia, produto do aquecimento da ureia, a seco. Deixar o tubo resfriar à temperatura ambiente.

Etapa 2:

Adicionar ao tubo resfriado naturalmente 1mL de solução de hidróxido de sódio 2N diretamente sobre o resíduo. Agitar o tubo vigorosamente até a completa dissolução do mesmo. Acrescentar 3mL de água destilada e 20 gotas da solução de sulfato cúprico 0,5%.