DETERMINAÇÃO DO ESPECTRO DE ABSORÇÃO DE CORANTES E CONSTRUÇÃO DE CURVA PADRÃO

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Prática I

DETERMINAÇÃO DO ESPECTRO DE ABSORÇÃO DE CORANTES E CONSTRUÇÃO DE CURVA PADRÃO

Larissa Guimarães Paiva

Matrícula: 14214070109

Piraí

2016

1. INTRODUÇÃO

O conhecimento da absorção de luz pela matéria é a forma mais usual de determinar a concentração de compostos presentes em solução. A maioria dos métodos utilizados na bioquímica envolve a determinação espectrofotométrica de compostos corados obtidos pela reação entre o composto a ser analisado e o reagente, originando um produto colorido.

Quando um feixe de luz monocromática atravessa uma solução com moléculas absorventes, parte da luz é absorvida pela solução e o restante é transmitido. A absorção de luz depende basicamente da concentração das moléculas absorventes e da espessura da solução. Quando essa solução é submetida a leituras de absorbância ao longo de uma faixa de comprimentos de onda eletromagnética, passamos a ter informações referentes à capacidade do composto em absorver luz, a representação gráfica dos valores de comprimento de onda versus absorbância é denominada espectro de absorção (BENTO, 2010).

Diante disso objetivou-se nessa primeira prática de química VI determinar o espectro de absorção das soluções de azul de bromofenol (ABF) e metilorange (MO), caracterizar o comprimento de onda onde ocorre a absorção máxima e construir uma curva padrão para um dos corantes.

1. DESENVOLVIMENTO

Determinação do Espectro de absorção

Primeiramente foram preparadas as soluções de azul de bromofenol (ABF) e metilorange (MO) nas concentrações de 0,01mg/mL. Logo após as soluções foram colocadas em béqueres com as seguintes composições.

Tabela 1: Soluções de azul de bromofenol (ABF) e metilorange (MO).

Soluções	Composição
ABF	5 mL de ABF
MO	5 mL de MO
ABF/2	2,5 mL de ABF + 2,5 mL de H2O
MO/2	2,5 mL de MO + 2,5 mL de H2O
ABF + MO	2,5 mL ABF + 2,5 mL de MO

Os espectros foram determinados nas absorbâncias dos comprimentos de onda relacionados na tabela a seguir, o aparelho foi calibrado à T = 100% em cada comprimento de onda com o branco (H2O), conforme indicado.

Tabela 2: Absorbâncias das soluções de ABF e MO em determinados comprimentos de onda.

	Abs. em comprimento de onda
	415	445	460	490	520	535	550	580	610	640
MO	0,562	0,638	0,651	0,503	0,212	0,94
MO/2	0,257	0,319	0,324	0,247	0,1	0,046
ABF					0,368	0,562	0,804	1,28	0,875	0,055
ABF/2					0,2	0,291	0,420	0,740	0,463	0,031
ABF+MO X H2O	0,264	0,325	0,343	0,313	0,276	0,312	0,394	0,671	0,407	0,24
ABF+MO X MO/2	0	0,02	0,05	0,059	0,167	0,260	0,373	0,666	0,420	0,23
ABF+MO X ABF/2	0,241	0,305	0,312	0,241	0,082	0,021	0,019	0,064	0,04	0,05

Após as leituras foi feito um gráfico de absorbância versus comprimento de onda e selecionado os comprimentos de onda adequados para construção da curva padrão de cada corante.

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De acordo com o gráfico 1 verificamos que o azul de bromofenol (ABF) absorve a luz visível com mais intensidade no comprimento de onda de 580nm. Na solução de metilorange (MO) é possível identificar que o ponto de maior absorção foi no comprimento de onda de 460nm. Ambas as soluções apresentaram seus pontos máximos de absorbância de luz, ou seja, menor transmitância, no comprimento de onda indicado na literatura.

Como a interação da luz com a matéria depende da estrutura química dos compostos, o espectro de absorção é uma forma de caracterização que permite verificar qual a faixa de comprimento de onda em que um dado composto apresenta sua maior afinidade de absorção. Embora dois ou mais compostos possam absorver luz dentro da mesma faixa de comprimento de onda, isso não invalida a especificidade do método, pois, normalmente, esta não reside no espectro de absorção (BENTO, 2010). Contudo, a sensibilidade do método depende da escolha do melhor comprimento de onda eletromagnética para leituras espectrofotométricas, pois só assim poderemos detectar o composto em baixas concentrações.

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