EXERCÍCIOS DE FIXAÇÃO - ELETROFORESE

DEPARTAMENTO DE FÍSICA E BIOFÍSICA

DISCIPLINA DE BIOFÍSICA COMPARADA

CIÊNCIAS BIOLÓGICAS – 2013

EXERCÍCIOS DE FIXAÇÃO - ELETROFORESE

1 - Você recebeu, em seu laboratório, uma amostra de veneno de uma rã amazônica. Existem indícios de que uma proteína com peso molecular de 120 kD, e ponto isoelétrico 7,0 que tem atividade hipotensora, e seria interessante no tratamento de hipertensão arterial cardiogênica. Que procedimentos adotaria para encontrar esta proteína? Justifique sua resposta.

2 – Analise o gel abaixo:

                                                               1    2      3   4      5[pic 1]

        [pic 2][pic 3][pic 4][pic 5]

         IEF

Que resultados você esperaria, considerando uma eletroforese nativa em gel de agarose, em pH 8,5, com relação à mobilidade relativa das proteínas assinaladas? E se a eletroforese fosse feita em pH 6,2?

E se a eletroforese fosse realizada em gel de poliacrilamida, mantendo-se os mesmos tampões no gel, que tipo de alterações você esperaria encontrar quanto às migrações?

3 - Você foi contratado como Biólogo responsável pelo LABORATÓRIO NACIONAL DE INVESTIGAÇÃO BIOLÓGICA. Seus colegas de equipe estavam pesquisando uma molécula no soro de um paciente que estava internado num hospital, sendo vítima de um provável envenenamento. Sabe-se que esse tipo especial de veneno não deixa resíduos no cadáver, mas o organismo sintetiza uma proteína, como resposta ao estímulo antigênico do veneno, com peso molecular de 38 kD, ponto isoelétrico de 8,6 e atividade biológica como ligante de heparina. Oriente sua equipe na identificação correta da proteína em questão.

4 – Seu assistente relatou a você que a eletroforese em gel de poliacrilamida não ficou pronta porque está demorando muito a correr. Cite, justificando, três procedimentos para corrigir esta corrida.

5 - Você recebeu em seu laboratório uma amostra de líquor de um paciente portador de um tumor cerebral. Sua equipe está pesquisando essa proteína para tentar formular um teste diagnóstico precoce. Formule, então, um esquema empregando métodos eletroforéticos para os procedimentos no laboratório, justificando sua resposta.

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