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A Coloração de Gram

Por:   •  16/9/2021  •  Pesquisas Acadêmicas  •  449 Palavras (2 Páginas)  •  227 Visualizações

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RESUMO COLORAÇÃO DE GRAM

        PRINCÍPIO DA COLORAÇÃO DE GRAM

Em suma, o procedimento de coloração de Gram permite que as bactérias retenham a cor com base nas diferenças nas propriedades químicas e físicas da parede celular. De fato, o uso dos corantes permite aumentar o contraste e evidenciar a estrutura bacteriana.

A coloração envolve 3 etapas principais:

  • Coloração com violeta de cristal (um corante solúvel em água, roxo);
  • A descoloração (utilizando etanol / acetona);
  • A contra-coloração (utilizando corante Safranina, vermelho).

DIFERENÇA ENTRE BACTÉRIA GRAM-POSITIVA E GRAM-NEGATIVA

A princípio, há diferentes graus de permeabilidade na parede dos microrganismos Gram-positivos e Gram-negativos.

As bactérias Gram-positivas retém o cristal violeta devido à presença de uma espessa camada de peptidoglicano (polímero constituído por açúcares e aminoácidos que originam uma espécie de malha na região exterior à membrana celular das bactérias) em suas paredes celulares, apresentando-se na cor roxa.

Já as bactérias Gram-negativas possuem uma parede de peptidoglicano mais fina  que não retém o cristal violeta durante o processo de descoloração e recebem a cor vermelha no processo de coloração final.

Exemplos de bactérias Gram-positivas

Bacillus, Nocardia, Clostridium, Propionibacterium, Actinomyces, Enterococcus, Cornyebacterium, Listria, Lactobacillus, Gardnerella, Mycoplasma, Staphylococcus, Streptomyces, Streptococcus.

Exemplos de bactérias Gram-negativas

Escherichia, Helicobcater, Hemophilus, Neisseria, Klebsiella, Enterobacter, Chlamydia, Pseudomonas, Salmonella, Shigella.

PASSO A PASSO DA METODOLOGIA DE GRAM

  1.  Cubra o esfregaço com violeta-de-metila e logo após deixe por aproximadamente 15 segundos;
  2.  Adicione igual quantidade de água sobre a lâmina coberta com violeta-de-metila e então deixe agir por mais 45 segundos;
  3.  Escorra o corante e lave em um filete de água corrente; Cubra a lâmina com lugol diluído (1/20) e deixe agir por aproximadamente 1 minuto;
  4.  Escorra o lugol e lave em um filete de água corrente;
  5.  Adicione álcool etílico (99,5º GL) sobre a lâmina; descorando-a, até que não desprenda mais corante;
  6.  Lave em um filete de água corrente;
  7.  Cubra a lâmina com safranina e deixe agir por aproximadamente 30 segundos;
  8.  Lave em um filete de água corrente;
  9.  Deixe secar ao ar livre, ou seque suavemente com o auxílio de um papel de filtro limpo;
  10.  Visualize no microscópio. Logo após leia em objetiva de imersão (100 X).

[pic 1]Método de coloração de Gram

APLICAÇÃO E BENEFÍCIOS DA COLORAÇÃO DE GRAM

De fato a metodologia irá ajudar na identificação de uma infecção bacteriana, determinando qual é o tipo de bactéria. Em outras palavras, a diferenciação das bactérias Gram-negativas e Gram-positivas permite ao médico determinar um tratamento eficaz ao paciente, dessa forma aplicando a terapia adequada em cada caso.

Mesmo que nem todas as bactérias possam ser diferenciadas através da coloração de Gram, com certeza a metodologia tem grande aplicação no diagnóstico clínico e pesquisa biológica.

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