O Procedimento Operacional Padrão

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Laboratório Barcelos

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Procedimento Operacional Padrão

Colesterol Liquiform

Edição: 24/03/2021

Revisão:

Identificação do produto e da empresa

Nome e código do produto: Colesterol Liquiform Ref.: 76

Empresa: Laboratório Mattos

Endereço: Rua Manoel Pereira n 34 Bairro: São Joao RJ

Telefone: (21) 998327149/ (21) 999238143

Princípio do teste

Também conhecido como colesterol total, é um precursor dos hormônios esteróides, é essencial para a fabricação de hormônios, agindo diretamente na reprodução e crescimento humano. Uma parte do colesterol é adquirida na dieta e outra chamada de HDL e LDL, importantes lipoproteínas presentes na corrente sanguínea.

A intensidade da cor vermelha formada na reação final é diretamente proporcional a concentração de colesterol na amostra.

Aplicação Clínica

O colesterol com seu valor elevado tem um significado clinico muito importante para o desenvolvimento de uma doença arterial coronariana, onde se tem um grande fator de risco. Sendo eles: cirrose,hipotireoidismo, hipercolesterolemia, hepatites virais entre outros. O sistema de dosagem do colesterol liquiform foi provado ser bastante seguro para uma medição confiável. O sistema espontaneamente aplicável em analisadores automáticos e

semiautomáticos capazes de medir uma reação de ponto final em 500 nm

e pode ser usado para medição do colesterol HDL após precipitação

seletiva das LDL e VLDL.

Amostra Realizada

Usar soro. Anticoagulantes como citrato, oxalato ou EDTA produzem

resultados falsamente diminuídos.

Preparo do paciente

De acordo com o Consenso Brasileiro para a Normatização da Determinação Laboratorial do Perfil Lipídico não há obrigatoriedade de realização de jejum de doze horas pelo paciente para a determinação de lipídeos. As concentrações de colesterol total, HDL-C, não-HDL-C e LDL-C não diferem significativamente se realizados em estado pós - prandial ou em jejum.

Armazenamento e estabilidade da amostra

O analito é estável 7 dias entre 2 - 8 ºC e 6 meses a 20 ºC negativos . Homogeneizar bem as amostras lipêmicas antes de iniciar a dosagem.

Critérios de exclusão da amostra

Não utilizar amostras fortemente hemolisadas.

Equipamentos e insumos:

1. Fotômetro capaz de medir, com exatidão, a absorbância entre 490 e 510 nm.

2. Pipetas para medir amostras e reagentes.

3. Cronômetro.

Reagentes:

Reagente 1 - Armazenar entre 2 - 8 ºC.Contém tampão 100 mmol/L, pH 7,0; fenol 24 mmol/L; colato de sódio 0,005 - 0,05%; azida sódica 14,6 mmol/L; 4-aminoantipirina 300 - 500 mol/L; colesterol esterase 250 - 1000 U/L; colesterol oxidase 250 - 1000 U/L, peroxidase 250 - 1000 U/L, cofator, estabilizadores e surfactante;

Padrão - 200 mg/dL - Armazenar entre 2 - 30 ºC. Contém colesterol 200 mg/dL, estabilizador, surfactante e conservante. Após o manuseio sugere-se armazenar bem vedado para evitar evaporação.

Cuidados:

Não utilizar o Reagente 1 quando sua absorbância, medida contra a água em 500 nm, for igual ou maior que 0,300 ou quando mostrar-se turvo ou com sinais de contaminação. Os cuidados habituais de segurança devem ser aplicados na manipulação do reagente. O Reagente 1 e o Padrão contém azida sódica que é tóxica.

Controle de Qualidade:

O laboratório deve definir claramente as regulamentações necessárias dos objetivos,procedimentos, aplicações e limites de controle. Materiais de controle devem ser utilizados para avaliar a ambiguidade e/ou desvios da calibração. Sugere-se procurar atender como limites máximos de controle os critérios propostos por NCEP para coeficiente de variação 3,00 %, erro sistemático (bias) 3,00 % e erro total 9,0 %.

Procedimento

Manual

Tomar 3 tubos de ensaio e proceder como a seguir:

Branco

Teste

Padrão

Amostra

Padrão(N2)

Reagente 1

----

----

1,0 ml

0,1 ml

----

1,0 ml

----

0,01 ml

1,0 ml

Misturar e incubar em banho-maria a 37 ºC durante 10 minutos.

Determinar as absorbâncias do teste e padrão em 500 nm ou filtro verde (490 a 510), acertando o zero com o branco. A cor é estável por 60 minutos.

Automatizados

NA

Cálculos

Absorbância do Teste

Colesterol (mg/dL) = ------------------------------x 200