Microbiologia

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UNIVERSIDADE FEDERAL DO TOCANTINS

Engenharia Bioprocessos e Biotecnologia

Prof. Dr. Alex Fernando de Almeida

PRÁTICA 4: CONTROLE DO CRESCIMENTO MICROBIANO

Daniel Firmino

Hemilly Martins

João Heitor

Jessica Durães

Mirelle

Gurupi-To

 11 de Dezembro de 2015

Sumário

 INTRODUCÃO        

3. OBJETIVOS GERAIS        

3.1. OBJETIVOS ESPECÍFICOS        

4. METODOLOGIA        

4.1. MATERIAIS        

4.2) PROCEDIMENTO        

5. RESULTADOS E DISCUSSÃO        

5.1 IMAGENS E ILUSTRAÇÕES        

CONCLUSÃO        

REFERÊNCIAS        

2. INTRODUCÃO

     

        O crescimento microbiano é associado ao crescimento de uma população de células de um dado microrganismo, ou seja, com o aumento do número de células da população. Grande parte dos microrganismos multiplica-se por fissão binária ou por gemulação, em resultado do que uma célula dará origem a duas ao fim de um certo tempo, tempo de geração ou de duplicação.

        Os primeiros métodos de crescimento microbiano foram criados para incluir práticas de assepsia em procedimentos médicos, essas técnicas impediam a contaminação durante o atendimento e a transferência de infecções entre pacientes, uma vez que essa era a causa de uma parte significativa das mortes durantes cirurgias.

        Cada método de controle microbiano atua de maneira diferente sobre os microrganismos dependendo das características de cada um. Os fungos e bolores, como exemplo, vivem muito melhor em ambientes com baixa umidade e alta pressão osmótica quando comparados com as bactérias, essa característica dos fungos combinado com sua capacidade de sobreviver em ambientes ácidos é a razão pelo qual as frutas e os grãos são deteriorados pelos fungos e não por bactérias.

       O calor é um dos métodos de controle microbianos mais utilizados pela sua eficácia na esterilização de objetos e na conservação de alimentos. Geralmente o calor mata os microrganismos pela desnaturação de suas enzimas resultando na mudando do formato tridimensional dessas proteínas.

3. OBJETIVOS GERAIS

        Estudar o efeito da temperatura, pH e pressão osmótica no controle do crescimento microbiano. Reconhecer o papel dos diferentes agentes físicos no controle microbiano, discutindo seus mecanismos de ação.

 3.1. OBJETIVOS ESPECÍFICOS

        Discutir a importância dos fatores do crescimento microbiano, em relação nas quais se situam os pH para o crescimento das espécies testadas na aula; os mecanismos de ação do pH e temperatura.

4. METODOLOGIA

4.1. MATERIAIS

Micro-organismos: Fungo filamentoso, Cândida Viswanathii, bactéria.

Meio de cultura:

Caldo nutritivo 

Extrato de levedura 3g, peptona 5g, Agar 20g, água destilada 1000ml.

Material:

Placa de petri, alça de inoculação, estufa bacteriológica, bico de bunsen, álcool 70% e papel toalha.

4.2) PROCEDIMENTO

a) EFEITO DA PRESSÃO OSMÓTICA SOBRE O CRESCIMENTO MICROBIANO

Inocular assepticamente, com uma alça de inoculação de fungos filamentosos crescidos em caldo nutritivo a 35ºC, por 24 h, em cada uma das placas contendo meio Agar nutritivo com as seguintes concentrações de cloreto de sódio (NaCl):0%,5%,10%, 15%.

Repetir a operação acima com uma cultura de Escherichia coli.

Incubar todas as placas a 35ºC por 48 h em estufa bacteriológica.

b) EFEITO DA TEMPERATURA SOBRE O CRESCIMENTO MICROBIANO

Inocular, assepticamente, com uma alça de inoculação uma cultura Escherichia coli, em meio Agar nutritivo.

Incubar todas as placas nas temperaturas de 25ºC, 40ºC e 60ºC por 48 h em estufa bacteriológica.

Repetir o procedimento acima com uma cultura de fungo filamentoso.

c) EFEITO DO pH SOBRE CRESCIMENTO MICROBIANO

Inocular, assepticamente, com uma alça de inoculação uma cultura de Escherichia coli, crescida em caldo nutritivo a 35ºC por 24 h em cada uma das placas contendo meio Agar nutritivo nos respectivos pH 3,0; 5,5; 9,0.

Repetir a inoculação em outras placas com uma cultura de fungos.

Incubar todos os tubos em estufa bacteriológica a 35ºC por 48 horas.

5. RESULTADOS E DISCUSSÃO

      Com a retirada das placas da estufa, verificou-se o crescimento de cada espécie e os registros foram feitos com a seguinte notação nas tabelas:

Crescimento abundante: +++

Crescimento moderado: ++

Crescimento escasso: +

Ausência de crescimento: -

Tabela 1.Comparação do crescimento das espécies microbianas em diferentes concentrações de cloreto de sódio (NaCl).

Pressão osmótica	0%	5%	10%
Staphylococcus aureus	+	++	++
Escherichia coli	++	++	+++
Saccharomycetaceae	++	+++	++

 

Tabela 2. Comparação do crescimento das espécies microbianas em diferentes temperaturas.

Temperatura	10ºC	28º	60º
Staphylococcus aureus	++	++	-
Escherichia coli	+	++	-
Saccharomycetaceae	++	++	+

Tabela 3.Comparação do crescimento de diferentes espécies microbianas em diferentes níveis de pH.  

pH	3,0	7,0	9,0
Staphylococcus aureus	+++	++	+++
Escherichia coli	++	++	+++
Saccharomycetaceae	+++	++	+++

 

5.1 IMAGENS E ILUSTRAÇÕES

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Figura 1. Crescimento microbiano em meio de cultura com pH 3,0; pH 7,0 e pH 9,0 respectivamente.