O RELATORIO BIOMOL

Aluna: Isabela Warwar Teixeira / 14214020268

Pólo: Duque de Caxias

Disciplina: Biologia Molecular

RELATÓRIO – PRÁTICA 1

INTRODUÇÃO

O DNA é uma molécula filamentosa longa, formada por um grande

número de desoxirribonucleotídeo e cada nucleotídeo que a que q compõe é

formado por um açúcar (pentose), uma base nitrogenada é um grupamento

fosfato. É uma dupla hélice que consiste em duas cadeias polinucleotídicas,

chamadas também de “filamentos” ou “fitas”, helicoidais enoveladas (para a

direita) ao redor de um eixo comum para formar uma dupla hélice de 20 Å de

diâmetro. As duas fitas de DNA são “anti-paralelas”, “complementares” e são

mantidas unidas por interações do tipo pontes de hidrogênio entre as bases

A (adenina), T (tonina), G (guanina) e C (citosina), formando os pares de base

A=T E C=G. As cadeias são ditas “complementares”, pois a base presente

em uma das cadeias determina a base presente na outra cadeia. A estrutura

resultante se assemelha à estrutura de uma escada em espiral.

O RNA é uma molécula longa e não ramificada, constituída por

nucleotídeos unidos por ligações fosfodiéster. A pentoseose do RNA é uma

ribose e suas quatro bases são: A (adenina), U (uracila), G (guanina) e C

(citosina), formam do os pares de base A=U e C=G. A célula possui vários

tipos de RNA, são eles: RNA mensageiro, RNA transportador, RNA

ribossômico e pequenas moléculas de RNA nuclear.

Esses 2 ácidos nucleico se diferem em:

▪ o DNA contém base T (tonina) e o RNA contém base U (uracila);

▪ O RNA existe em fita simples e o DNA em fita dupla-fita;

▪ O esqueleto pentose-fosfato de RNA contém ribose e o de DNA

contém desoxirribose

Existem aspectos que diferenciam os procedimentos de extração de DNA e

RNA, como os protocolos para a extração do RNA serem mais criteriosos,

exigindo uma maior rigidez quanto a eliminação da RNAse, isso se deve ao

fato de que as moléculas de RNA, por se encontrarem em fita simples, são

mais instáveis, sendo facilmente degradadas.

Para extração do RNA de um tecido ou organismo é necessário tratar

todas as vidrarias e soluções que serão utilizadas para que fiquem totalmente

livres de RNAse. As vidrarias são esterilizadas a alta temperatura durante

longos períodos de tempo e as soluções são tratadas com dietilpirocarbonato

(DEPC), um reagente que interage com a RNAse inativando-a. Após o

tratamento, essas são esterilizadas por alta pressão e temperatura

(autoclavagem). Adicionalmente, a RNAse é uma proteína altamente estável

e abundante, podendo ocorrer em diversas superfícies.

A extração de DNA dispensa uso de reagentes fortes para inibição de

nucleares mas exige critérios de limpeza e esterilização das vidrarias a serem

utilizadas. A DNAse geralmente é inativada durante o processo de extração,

e a mesma existente em vidrarias e soluções é degrada por autoclavagem.

OBJETIVO

Será realizada uma extração de DNA genômico nessa aula prática,

executando um protocolo com passo a passo, afim de aprender com detalhes

a metodologia de extração, bem como observar os cuidados exigidos pelo

procedimento.

MATERIAIS

• Detergente de cozinha;

• Sal de cozinha (NaCl);

• Álcool;

• Copos descartáveis 100ml;