A Toxicidade Aguda E Prolongada Ao Fipronil Em Peixes

                

Universidade Paulista

GIOVANNA KRASUCKI BOVINO

TOXICIDADE AGUDA E PROLONGADA AO FIPRONIL EM PEIXES Danio rerio (ZEBRAFISH): ESTUDOS HISTOLÓGICOS EM BRÂNQUIAS.

São Paulo

2020

GIOVANNA KRASUCKI BOVINO

TOXICIDADE AGUDA E PROLONGADA AO FIPRONIL EM PEIXES Danio rerio (ZEBRAFISH): ESTUDOS HISTOLÓGICOS EM BRÂNQUIAS.

Trabalho de Conclusão de Curso como parte do exigido para obtenção do título de graduação em Medicina Veterinária apresentado à Universidade Paulista – UNIP.

Orientadora: Profa. Dra. Ana Cristina Tasaka

São Paulo

2020

GIOVANNA KRASUCKI BOVINO

TOXICIDADE AGUDA E PROLONGADA AO FIPRONIL EM PEIXES Danio rerio (ZEBRAFISH): ESTUDOS HISTOLÓGICOS EM BRÂNQUIAS.

Trabalho de Conclusão de Curso como parte do exigido para obtenção do título de graduação em Medicina Veterinária apresentado à Universidade Paulista – UNIP.

Orientadora: Profa. Dra. Ana Cristina Tasaka

Aprovado em:

BANCA EXAMINADORA:

AGRADECIMENTOS

Primeiramente gostaria de agradecer aos meus pais, por todo o apoio que me foi dado antes e durante este trabalho. Por terem me inspirado todos os dias a ser quem eu sou e a seguir a carreira dos meus sonhos, com ética, sabedoria, amor e comprometimento. Por terem estado ao meu lado nos momentos difíceis da graduação, assim como, antes da universidade. Por terem me encorajado a não desistir desta carreira que tanto vislumbro.

Agradeço as minhas amigas da universidade, por todo apoio, força, pelas risadas, por todo amor que foi trocado nesses 5 anos de graduação.

Agradeço a esta universidade, seu corpo docente, direção e administração por me abrirem a janela na qual hoje vislumbro um horizonte superior.

Agradeço em principal a Professora Doutora Maria Martha Bernardi, por ter me introduzido ao âmbito da pesquisa, e por ter me adotado como sua pupila na Farmacologia Veterinária.

Agradeço também a Professora Doutora Ana Cristina Tasaka, quem me acolheu desde o inicio do curso, me inspirando a ser sempre melhor com seus ensinamentos diários não somente da Farmacologia como da vida em si. 

"Só se pode alcançar um grande êxito quando nos mantemos fieis a nós mesmos."

Friedrich Nietzsche

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RESUMO

Trata-se de trabalho de Iniciação Científica. Neste trabalho foram investigados os efeitos das concentrações subletais da exposição prolongada de fipronil na histologia do Danio rerio (zebrafish) adulto como uma expressão da toxicidade respiratória; a concentração subletal aguda já havia sido previamente calculada em 0.5 μg/L. Para a determinação da concentração subletal prolongada do fipronil os peixes foram expostos a diferentes concentrações por 7 dias. A porcentagem de mortes foi anotada, e ao final das exposições, os animais foram anestesiados, suas brânquias retiradas e preparadas para avaliação histológica para análise em microscopia óptica e eletrônica. Os resultados mostraram que após 144 horas de exposição: 1) as concentrações de 0,40 μg/L produziu morte em todos animais em 24 horas: 2) nas concentrações de 0,16 a 0,02 μg/L observou-se sobrevida que variou entre 0 a 60% dos peixes ao final de 7 dias. 3) A concentração não letal crônica foi de 0,01μg/L; 4) Na histologia por microscopia verificou-se a presença de infiltrado linfocitário, descolamento de epitélio respiratório, presença de células rodlets e muco entre lamelas. Estes resultados indicam a presença de lesões branquiais 5) A análise por microscopia eletrônica de varredura está sendo feitas no momento. Concluiu-se que a exposição prolongada ao fipronil apresenta alta toxicidade prolongada a peixes zebrafish. O objetivo deste trabalho é o de relatar o desenvolvimento, resultados e conclusões obtidos dessa experimentação, apresentado em 19 de Setembro de 2018, sob orientação da Profa. Dra. Maria Martha Bernardi, nas dependências do Instituto de Ciências da Saúde da Universidade Paulista - UNIP.

Palavras-Chave: brânquias, praguicida, toxicidade aquática.

ABSTRACT

This study investigated the effects of a chronic exposure to a sublethal concentrations on histology of gills as an expression of respiratory toxicity. The acute sublethal concentration was previously calculated (0.5 μg / L). For the determination of the prolonged sublethal concentration of fipronil the fish were exposed to different concentrations of fipronil for 7 days. The percentage of deaths was noted. At the end of the exposures, the animals were anesthetized, and their gills removed and prepared for histological evaluation for analysis under light and electron microscopy. The results showed that after 144 hours of exposure: 1) the concentration of 0.40 μg / L produced death in all animals in 24 hours: 2) at concentrations of 0.16 to 0.025 μg / L survival ranging from 0 to 60% of fish at the end of 7 days. 3) the non lethal concentration was 0.01 μg/L. 4) the histology by optical microscopy showed the presence of lymphocytic infiltrate, detachment of respiratory epithelium, presence of rodlets and mucus cells between lamellae. These results indicate the presence of branchial lesions 5) the scanning electron microscopy analysis is currently being done. It is concluded that prolonged exposure to fipronil presents high prolonged toxicity to zebrafish fish. ^[1]

Key words: gills, pesticides, aquatic toxicity

SUMÁRIO

1 INTRODUÇÃO …………………………………………………………………..….…..9

1.2 SOBRE OS MODELOS EM PESQUISA ANIMAL …………………….………..…10

1.3 SOBRE O ZEBRAFISH ………………………………………….……………..……11

1.4 UMA BREVE INTRODUÇÃO SOBRE PRAGUICIDAS ………………………..…13

2 MÉTODO …………………………………………………………………………………16

2.1 ANIMAIS ………………………………..……………..……………………………… 16

2.2 DROGAS ………………………..………………………………………………..……17

2.3 PROSPECÇÃO DA CONCENTRAÇÃO PROLONGADA LETAL DO FIPRONIL.17

2.4 HISTOLOGIA DAS BRÂNQUIAS ……………………………………………………17

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