Hidrolise do amido

Disciplina: Bioquímica [pic 1]

Professora: Priscilla Henriques Groetaers de Souza Costa

I - Segurança

Para que se inicie uma atividade que envolva o manuseio de uma substância química, além de outros instrumentos científicos, o operador deve ter consciência e a firmeza em buscar as informações pertinentes à atividade a ser desenvolvida.  Uma, duas e até mais leituras da técnica devem ser realizadas, até que o operador esteja confiante e possa realizar a tarefa com total segurança.

II - Roteiro de Prática 02: Caracterização dos Triacilgliceróis do Óleo de Soja através da Saponificação

1 - Aparelhagem e Material utilizado:

• Tubos de ensaio 10 X 150 mm e 15 X 190 mm;
• Becher de 500 ml;
• Placa de aquecimento;
• Pérolas de vidro;
• Pipetas de 2 e 5 mL.;
• Estante para tubos de ensaio.

2 - Reagentes:

• Óleo de Soja;
• Ácido Clorídrico concentrado;
• Solução de Potassa alcoólica;
• Solução de Cloreto de Cálcio a 10%;
• Solução saturada de Cloreto de sódio.

3 - Kits por bancada:

• 1 estante para tubos de ensaio;
• 1 tubo de ensaio 15 X 190 mm;
• 5 tubos de ensaio 10 X 150 mm;
• 1 pipeta de 5 ml;
• 1 pêra;
• 1 becher de 500 ml;

OBS: Para uso de todos os alunos, colocar na capela o frasco com HCl concentrado. Manter a capela ligada.

4 - Procedimento:

• Adicionar 1,5 ml de Óleo de soja e 10 ml de Potassa alcoólica ao tubo de ensaio contendo 20 pérolas de vidro. Aquecer em banho-maria à ~ 85ºC por 30 minutos. A temperatura do banho deve ser controlada de modo a permitir que o conteúdo do tubo de ensaio esteja sempre em ebulição. Nestas condições, o óleo é saponificado obtendo-se uma pasta branca de sais de potássio de ácidos graxos (sabões) e glicerol.
• Pipetar 2 ml da solução contendo sabão (solução mãe) e adicionar em um tubo de ensaio (Tubo I). Completar o volume até 5 ml com água.  Agitar a solução de sabão e verificar se haverá formação de espuma. A partir deste tubo transferir alíquotas de 1ml para outros 2 tubos:

- Tubo II: Adicionar 0,5 ml de Solução de Cloreto de Cálcio a 10%. Agitar.

- Tubo III : adicionar 3 ml de Solução Saturada de Cloreto de Sódio. Agitar,

• Pipetar 1 ml da solução contendo sabão (solução mãe) e adicionar em um tubo de ensaio (Tubo IV). Adicionar 1 gota de Ácido sulfúrico concentrado (ou HCl), na capela. Caso o ácido não seja concentrado, adicionar 10 gotas. Não agitar.

• Verificar a formação de precipitado nos nos tubos II e IV e de sólidos em suspensão no tubo III (olhar contra a luz);
• Tubo V: Acrescentar 1 mL de óleo, 1 mL de água e 1 mL da solução contendo sabão (solução mãe) em um tubo. Agitar e observar a formação de uma emulsão. Para fins de comparação, preparar um tubo controle contendo 1 mL de óleo e 1 mL de água. Agitar.

5 - Fluxograma de Análise:

Caracterização dos Triacilgliceróis do Óleo de Soja através da Saponificação

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6 - Preparo de Soluções

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