Os Princípios e as principais aplicações da cromatografia

CROMATOGRAFIA

Beatriz Ceschini, Matheus Fernandes Neves

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Objetivo: Através do experimento definir os princípios e as principais aplicações da cromatografia, para poder fazer uso da mesma para separar e identificar os componentes de uma mistura. 

Palavras-chave: cromatografia, mistura, separação.

1. RESULTADOS E DISCUSSÃO

A cromatografia é uma técnica de utilizada para separação de substância e determinação de componentes de uma mistura. Os conceitos básicos da cromatografia envolvem as forças intermoleculares, a polaridade e a interação entre soluto e solvente. Neste experimento foi realizada a cromatografia em papel. “A cromatografia em papel é uma microtécnica muito útil para a separação de componentes de uma mistura e realização da análise qualitativa dos mesmos em função dos Rf (fatores de retenção) e cores apresentadas.” (COLLINS; BRAGA; BONATO; 1997; pág. 31).

O papel-filtro permite através de sua capilaridade, e com ação das forças intermoleculares entre o papel e o líquido (fase móvel), que o líquido suba gradativamente levando junto dele as substâncias de acordo com suas características e realizando a separação de cada componente, permitindo a visualização. O papel deve estar marcado com duas linhas. Uma linha simboliza o início (linha contínua), a fase móvel fica abaixo desta linha e os componentes analisados ficam sobre a linha. A segunda linha marca o final (linha tracejada), que é dado no momento que o líquido chega a esta linha.

O experimento de cromatografia foi realizado três vezes. Foram feitos dois solventes, o primeiro  etanol, 1-butanol e acetona (proporção 1:1:1), foi usado nos dois primeiros experimentos. Na terceira experiência foi usada uma solução de etanol, acetona e amônia (proporção 1:1:1).

O primeiro e o terceiro experimento, foram realizados em um papel-filtro de 9,5 cm por 17 cm. O segundo experimento foi realizado em um papel-filtro de 8 cm por 13 cm. Foram traçadas linhas  nas margens superiores (linha contínua)e inferiores (linha tracejada) de 1,5 cm de distância das bordas dos três papéis-filtro.

Nos experimentos foi analisado o fator de retenção (Rf), que é a razão entre a distância percorrida pelo composto (substância) (ds) e a distância percorrida pelo solvente (dm). Ou seja:

• [pic 2]

A distância percorrida pelo composto, ds, é medida da origem até o centro da mancha. A distância percorrida pelo solvente, dm, ou fase móvel se encontra entre as duas linhas marcadas. Para o primeiro e o terceiro experimento, dm=. O segundo experimento tem dm=.[pic 3][pic 4]

No primeiro experimento, foram marcados seis pontos equidistantes na linha contínua, cada um por uma caneta hidrográfica, cujas cores foram identificadas a lápis logo abaixo. Essas cores foram, em ordem, vermelho, azul, amarelo, verde, marrom e preto. Em seguida, o papel-filtro foi enrolado, para adquirir a forma de um cilindro, e então, suas extremidades opostas foram grampeadas, de forma que permanecesse de pé para o experimento.

Foi adicionada a um béquer a mistura de etanol, 1-butanol e acetona, até aproximadamente 1,5 cm de altura e, nesse mesmo béquer, foi inserido o cilindro de papel com as marcações feitas. Esperou-se o tempo necessário até que a solução alcançasse as marcações tracejadas no topo no papel. O papel foi retirado de dentro do béquer, assim como seus grampos, e foi secado. Na tabela 1 é possível ver os valores de ds, dm e Rf do experimento. Observe o cromatograma na figura 1.

Tabela 1: Fator de retenção: 1º experimento.

Cor	dm (cm)	ds1 (cm)	Rf 1  (cm)	ds2  (cm)	Rf 2 (cm)
Vermelho	6,5	0,5	0,08	_____	_____
Azul	6,5	0,7	0,11	4,7	0,72
Amarelo	6,5	0,1	0,02	_____	_____
Verde	6,5	0,4	0,06	1,0	0,15
Marrom	6,5	1,1	0,17	_____	_____
Preto	6,5	0,6	0,09	3,2	0,54

No segundo experimento, sobre a linha contínua foram colocados sete diferentes de corantes. Seis destes corantes possuíam identificação numérica, que foi marcada abaixo do ponto de seus devidos corantes. A sétima amostra, nomeada de Y, se tratava de uma amostra desconhecida. Assim como no primeiro experimento o papel-filtro foi enrolado, de forma a adquirir a forma de um cilindro e grampeado. Um béquer recebeu o solvente (etanol, 1-butanol e acetona) até aproximadamente 1,5 cm e o cilindro de papel-filtro foi colocado, e o béquer foi tampado com a placa de Petry. O experimento ficou em repouso o tempo necessário até que a solução alcançasse a marcação tracejada no topo no papel, então, o papel foi retirado de dentro do béquer. Os grampos foram removidos e o papel foi secado. As seguir a tabela de  valores de ds, dm e Rf do experimento e o cromatograma 2.[pic 5]