REAÇÕES DE CARACTERIZAÇÃO DE CARBOIDRATOS. MÉTODOS DE DOSAGEM DE MONOSSACARÍDEOS

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REAÇÕES DE CARACTERIZAÇÃO DE CARBOIDRATOS. MÉTODOS DE DOSAGEM DE MONOSSACARÍDEOS

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Departamento de Química

Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto

Universidade de São Paulo.

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1. Objetivo

Utilizando métodos de dosagem de monossacarídeos visamos caracterizar carboidratos observando seu comportamento com temperaturas e reagentes diferentes.

1. Resultados e discussão

1. Reações características dos carboidratos

Colocou em diferentes tubos de ensaio um pequeno volume (40 gotas ou 2 mL) de cada solução de açúcar disponível e adicionou uma quantidade equivalente do reagente de Benedict. Homogeneizou e colocou os tubos num banho-maria a aproximadamente 100 °C durante 2 min. Deixou-se esfriar e anotou os resultados. Repetiu o mesmo procedimento, empregando agora o reagente de Tollens.

    Tabela 1 – Estudo das características dos carboidratos com diferentes reagentes.

Tubo	Carboidrato	Estrutura	Cor inicial	Cor Final (Benedict)	Cor Final (Tollens)
1	Maltose	[pic 6]	Incolor	Vermelho	Preto
2	Sacarose	[pic 7]	Incolor	Azul	Incolor
3	Glicose	[pic 8]	Incolor	Vermelho	Prata
4	Galactose	[pic 9]	Incolor	Vermelho	Prata
5	Lactose	[pic 10]	Incolor	Vermelho	Preto

Através do experimento observou-se que os tubos contendo sacarose não reagiram com os devidos reagentes, pois a sacarose não é um açúcar redutor e assim não a apresenta carbono livre que possa sofrer oxidação e provocar a redução no reagente.

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Figura 1 – Reação de Benedict.

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Figura 2 – Reação de Tollens

1. Determinação Quantitativa da Glicose

Seguiu a seguinte tabela para o protocolo abaixo para empregar uma curva padrão e analisou uma amostra desconhecida de glicose (amostra 6):

Tabela 2 – Determinação quantitativa da Glicose.

Tubos	Glicose (mL)	H2O	Glicose (mg)	Reagente	Abs
1	0,2	1,3	0,36	1	0,388
2	0,4	1,1	0,72	1	0,530
3	0,6	0,9	1,08	1	0,814
4	0,8	0,7	1,44	1	0,928
5	0	1,5	0	1	Branco
Amostra 6	N/A	N/A	N/A	N/A	0,318

Partindo de uma solução padrão de glicose de concentração 0,01 M, preparou soluções contendo entre 0,35 e 1,5 mg de glicose, em um volume final de 1,5 mL. Adicionou a cada tubo 1,0 mL do reagente ANS, colocando-os em banho-maria a aproximadamente  100 °C por 5 minutos deixou esfriar e completou o volume para 10 mL. Leu a absorbância de cada tubo em 540 nm.

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Figura 3 – Curva padrão da determinação quantitativa de glicose.

O cálculo de mg total da amostra foi efetuado através da equação da reta onde se considerou o eixo y para absorbância e o eixo x para mg. Dessa forma obteve-se:

mgtotal = (Abs-0,0756)/0,6339 => mg = (0,318 - 0,0756)/0,6339 => mg = 0,3824

Sendo assim, obteve-se que a quantidade de glicose total na amostra é de 0,3824 mg/mL em relação ao valor esperado que fosse de 0,36 mg/mL.

1. Determinação de lactose no Leite

Tabela 3 – Determinação de lactose no leite.

Tubo	H2O	Lactose (mL)	Amostra	Lactose (µg/mL)	Somogyi	Nelson	H2O	Abs
1	0,8	0,2	N/A	20	1	1	7	0,058
2	0,6	0,4	N/A	40	1	1	7	0,111
3	0,4	0,6	N/A	60	1	1	7	0,154
4	0,2	0,8	N/A	80	1	1	7	0,232
5	0	1	N/A	100	1	1	7	0,290
6	N/A	N/A	X 1	-	1	1	7	0,102
7	N/A	N/A	Y 1	-	1	1	7	0,078
8	1	0	0	0	1	1	7	Branco

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