Meio De Cultivo Microbiologia

INTRODUÇÃO

Para ocorrer a sobrevivência e a proliferação de micro-organismos em um determinado meio é necessário que tenha o fornecimento adequado de nutrientes, pH, luz e temperatura para devidas condições de crescimento. Além de tudo isso é preciso saber o potencial de crescimento de cada meio de cultura e adequar ao perfil bacteriano esperado para cada material.

Existem diversos tipos de meio de cultura como: ágar nutriente, ágar sangue, ágar chocolate, ágar macconkey, ágar salmonella-shigella,ágar hektoen enteric, ágar cystine Lactose Electolyte deficient, ágar Thayer-Martin Chocolate, ágar Löwenstein-Jensen, ágar Saboraud, ágar Regan-Lowe, ágar verde brilhante, ágar Mueller-Hinton.

Dentre estes, os usados em aula de laboratório foram o ágar MacConkey, onde o cristal violeta inibe o crescimento de micro-organismos Gram positivos especialmente enterococos e estafilococos e é utilizado para isolar bacilos Gram negativos (enterobactérias e não fermentadores) e verificar a fermentação ou não da lactose, e o ágar Mueller-Hinton que é utilizado na realização do teste de avaliação da resistência aos antimicrobianos pelos métodos de difusão em disco e E-test para enterobactérias, não fermentadores, Staphylococcus, Enterococcus sp.

Neste relatório será abordado os procedimentos para realização do meios de cultura de ágar MaConkey e ágar Mueller-Hinton.

MATERIAIS

Ágar Mac Conkey

Ágar Mueller Hinton

Água

Solução Salina (NaCl 0,9%)

Placa de Antibiótico

Placa de Petri

Erlenmeyer

Rolha

Proveta

Microondas

Auto Clave

Câmara de Fluxo Laminar

Geladeira

Bico de Bunsen

Balança

Papel Manteiga

Alça Bacteriológica

Tubo de Ensaio

Suabe

PROCEDIMENTO

Procedimento aula 1:

Pesou-se os dois pós para o preparo do meio de cultura.

Mediu-se, na proveta, 60mL de água a ser utilizada em cada um dos processos de preparo do meio de cultura.

Colocou-se a água no erlenmeyer.

Adicionou-se o pó no erlenmeyer já devidamente etiquetado e agitou-se até completa homogeneização.

Levou-se as vidrarias com as soluções no micro-ondas para cozinhar.

Em seguida levou-se as vidrarias para a auto-clave por 15min na temperatura de 121°C.

Durante esse processo, colou-se as placas dentro da câmara de fluxo laminar com luz ultra violeta.

Após esse período retirou-se os meios de cultura já esterilizados nos erlenmeyers da auto-clave.

Ainda com as placas dentro da câmara, separou-se os meios de cultura nas placas devidamente identificadas.

Tampou-se as placas para resfriar mais depressa.

Levou-se as placas com meio de cultura para a geladeira com a tampa para baixo para evitar evaporação e criação de organismos indesejados.

Procedimento aula 2:

Retirou-se as placas da geladeira após uma semana.

Deixou-se as placas aquecendo próximo ao bico de bunsen.

- Ágar MacConkey

Realizou-se a técnica de esgotamento nas placas com meio de cultura do Ágar Mac Conkey (MC).

Esterilizou-se a alça bacteriológica na chama do bico de bunsen.

Pegou-se na placa que já continha as colônias de bactéria, um pouco das mesmas com a alça bacteriológica.

Primeiramente realizou-se estrias na placa em zig-zag no sentido vertical da placa de meio de cultura até 1/3 da mesma.

Esterilizou-se novamente a alça bacteriológica.

Em seguida fez-se três estrias no sentido diagonal, começando em cima das primeiras estrias feitas.

Repetiu-se as três estrias porém sem tocar em locais já cultivados.

Finalizou-se a técnica fazendo estrias no sentido vertical no espaço sem bactéria.