A Solução Padrão Corante

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UNIVERSIDADE FEDERAL DO PARANÁ - UFPR SETOR PALOTINA Análise Instrumental – Profª Ivonete Rossi Bautitz

AULA PRÁTICA  – Espectrofotometria UV-Vis

OBJETIVO

• Determinar por meio de espectrofotometria UV-Vis a concentração de uma solução de azul de metileno. 

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MATERIAL

Balão volumétrico de 50,0; pipeta graduada de 10, 5 e 2 mL; conta gotas; cubetas de vidro ou plástico, caminho óptico de 1 cm

REAGENTES

Solução estoque de azul de metileno 100,0 mg L-1.

PARTE EXPERIMENTAL

1 - Obtenção do espectro de absorção do azul de metileno

Enche-se uma cubeta, caminho óptico de 1 cm, com a solução padrão de azul de metileno (5 mg L-1) e outra cubeta com água destilada para o branco. Em seguida, devem ser medidas as absorbâncias nos comprimentos de onda 450, 470, 490, 510, 530, 550, 570, 590, 610, 620, 640, 650, 660, 665, 670, 680, 690, 700 nm. Cada grupo deverá fazer algumas medidas e repassar o valor para os colegas.

No equipamento, selecionar o comprimento de onda desejado por meio da tecla GO TO λ e digitar o comprimento de onda desejado. Para cada novo ajuste do comprimento de onda posicionar a cubeta com o branco. Em seguida posicionar a cubeta do padrão e proceder à leitura da absorbância.

De posse dos dados de absorbância, para cada comprimento de onda, construir o gráfico do espectro de absorção do azul de metileno e definir o comprimento de absorção máximo.

2 – Obtenção da curva analítica

Deverão ser preparadas soluções padrão de azul de metileno nas concentrações 1,5; 2,5; 3,5; 5,0 mg L-1 a partir da solução estoque de 100,0 mg L-1 em balões de 50 mL. As diluições deverão ser feitas por meio do cálculo da diluição C1V1 = C2V2, onde o C1 refere-se a concentração da solução estoque de azul de metileno (100,0 mg L-1), V1 é o volume que será calculado, C2 é a concentração do padrão da curva que se deseja preparar e V2 é o volume do balão que será utilizado. Após cálculo do volume a ser tomado para preparar o padrão da curva analítica, pipetar o volume correspondente e completar o balão com água destilada.

Após preparar todos os padrões para a curva analítica proceder à leitura no comprimento de onda de absorção máxima do analito. Lembrando que o branco só será necessário analisar na primeira medida, pois o comprimento de onda máximo será mantido.

3 – Determinação da concentração de azul de metileno em uma amostra

Cada grupo deverá retirar uma amostra dentre o conjunto de amostras preparadas e proceder à leitura da absorbância no comprimento de onda máximo do azul de metileno.

Após a leitura, a concentração da amostra deverá ser determinada por meio da equação da reta da curva analítica a qual foi preparada anteriormente.

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