Relatorio sobre precipitação de proteinas por sal e solvente

1 INTRODUÇÃO

As proteínas são polímeros macromoleculares cujas unidades básicas são os aminoácidos que são ligados por ligações peptídicas. Elas desempenham um papel muito importante em nosso organismo, pois fornece material tanto para a construção como para a manutenção de todos os nossos órgãos e tecidos.

As proteínas podem ser de origem vegetal ou animal. No caso das primeiras, elas são consideradas incompletas por serem pobres em variedade de aminoácidos essenciais (aqueles que o corpo não é capaz de produzir). Já a proteína de origem animal, é considerada completa por conter todos os aminoácidos essenciais. Elas são de extrema importância para o nosso organismo por sua função construtora e reparadora. Elas também participam da formação de hormônios, enzimas e anticorpos.

1.1 Precipitação de proteínas por adição de sais neutros

Altas concentrações de sais precipitam proteínas de suas soluções. Este fenômeno é denominado de “salting out” ou precipitação por sais. Os sais desidratam as proteínas, atraindo as moléculas de água do meio, de modo a ficar menos água disponível para as moléculas protéicas. A solubilidade de uma proteína depende da quantidade de água disponível ao redor de seus grupos iônicos (quanto menor for o número de moléculas de água, menor será a solubilidade). Por outro lado, baixas concentrações de sais podem aumentar a solubilidade de muitas proteínas. Este fenômeno é conhecido como “salting in” ou solubilização por sais. Isso pode ser explicado através da interação entre os íons salinos e as cargas iônicas das proteínas, aumentando, assim, o número efetivo de cargas (a tendência de ionização dos grupos dissociáveis das proteínas) e a quantidade de moléculas de água fixadas à ionosfera protéica. De modo geral, pequenos aumentos da força iônica solubilizam melhor as proteínas, enquanto que aumentos maiores provocam a precipitação das mesmas.

1.2 Precipitação por solventes orgânicos

 

2 OBEJETIVOS

Precipitar proteínas por adição de sais neutros e por solventes orgânicos.

3 MATERIAL E MÉTODOS

3.1 Material

3.1.1 Precipitação de proteínas por adição de sais neutros

Água destilada;

Béquer de 50 mL e 100 mL;

Pipetas de vidro ou plástico;

Pera;

Balança de precisão;

Proteína;

(NH4)2SO4 (Sulfato de amônio);

12 tubos de ensaio;

Suporte para tubo de ensaio;

NaCL (cloreto de sódio) solido .

3.1.2 Precipitação por solventes orgânicos

Gelatina em pó;

Água destilada;

Tubos de ensaio;

Suporte para tubo de ensaio;

Cloreto de sódio sólido;

Etanol 95% gelado;

Acetona gelada;

Microondas;

Béquer;

Balança de precisão;

Pipetas de vidro ou plástico;

Pera;

3.2 Métodos

3.2.1 Precipitação de proteínas por adição de sais neutros

Preparo das soluções:

Preparou solução de NaCl 1% contendo 50 mL de água destilada e 0,5 g de NaCl;

Preparou-se a solução de proteína contendo 3 mL de proteína e 12 mL de solução de NaCl 1%;

Preparou-se a solução saturada de sulfato de amônio que continha 7,7g do sal (NH4)2SO4 e 10 mL de água destilada.

Experimento foi feito em triplicata, então se repetiu este processo três vezes para os dois sais:

Primeiro colocou-se em um tubo de ensaio 2 mL da solução de proteínas;

Segundo adicionou-se 2 mL da solução de sulfato de amônio;

Terceiro observou-se o resultado;

Quarto Misturou-se o conteúdo do tubo por inversão;

Quinto repetiu-se os processos anteriores substituindo a solução saturada