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A CROMATOGRAFIA EM PAPEL E CAMADA DELGADA

Por:   •  6/1/2018  •  Ensaio  •  535 Palavras (3 Páginas)  •  427 Visualizações

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[pic 1]

BRUNA MARTINS

ELOÁ MIRIAN

EDNA JINGA

GEOVANA DIAS

IVANA COSTA

SABRINA ALECSANDRA

CROMATOGRAFIA EM PAPEL E CAMADA DELGADA

LONDRINA – 2017


1 INTRODUÇÃO

Grande parte da pesquisa na química de proteínas envolve a separação e a identificação das proteínas estudadas (CAMPBELL et al., 2015; FARREL et al., 2015). Por meio da cromatografia em papel e camada delgada distinguimos os componentes de uma mistura de aminoácidos observando a migração dos mesmos em papel e camada delgada. Esta é uma técnica analítica de separação de misturas.  

A técnica de cromatografia em papel separa os aminoácidos com base em sua polaridade, os componentes da mistura migram devido a interação entre duas fases imiscíveis, a fase móvel (a porção do sistema na qual a mistura a ser separada se move) e a fase estacionária (a substância retarda seletivamente o fluxo da amostra, afetando a separação). Quanto mais polar for o aminoácido, mais fortemente ele será adsorvido no papel, que é uma fase estacionária polar, e se deslocarão mais lentamente pelo papel.

Os aminoácidos são ácidos carboxílicos que possuem uma função anima como podemos ver na figura 2. Uma ligação amida entre a função do ácido carboxílico de um aminoácido e o nitrogênio do grupo amino de outro aminoácido é chamada de ligação peptídica.

[pic 2]

        


2 RESULTADOS E DISCUSSÕES

2.1 CROMATOGRAFIA EM PAPEL

O deslocamento da fase móvel foi de 17,5 cm e os deslocamentos dos aminoácidos e da amostra estão nas tabelas a seguir.

Tabela 1. Deslocamento dos aminoácidos.

Lisina

Ácido aspártico

Leucina

Valina

Deslocamento (cm)

2

3,2

13,5

8,6

Tabela 2. Deslocamento da amostra.

Ponto 1

Ponto 2

Ponto 3

Deslocamento (cm)

2,1

8,6

13,4

2.1.1 CÁLCULO DO FATOR DE RETENÇÃO

Lisina

Rf = 2/17,5

Rf = 0,114

Ácido aspártico

Rf = 3,2/17,5

Rf = 0,183

Leucina

Rf = 13,5/17,5

Rf = 0,771

Valina

Rf = 8,6/17,5

Rf = 0,491

Ponto 1

Rf = 2,1/17,5

Rf = 0,12

Ponto 2

Rf = 8,6/17,5

Rf = 0,491

Ponto 3

Rf = 13,4/17,5

Rf = 0,766

Os valores dos pontos 1 e 3 não são exatamente iguais aos dos padrões, mas chegam a valores bem próximos.

Portanto, pode-se afirmar que os pontos 1, 2 e 3 são lisina, valina e leucina respectivamente.

2.2 CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA

O deslocamento da fase móvel foi de 19,5 cm e os deslocamentos dos aminoácidos e da amostra estão nas tabelas a seguir.

Tabela 3. Deslocamento dos aminoácidos.

Lisina

Ácido aspártico

Leucina

Valina

Deslocamento (cm)

2,8

4

11,9

8,3

Tabela 4. Deslocamento da amostra.

Ponto 1

Ponto 2

Ponto 3

Deslocamento (cm)

2,7

8,2

12,1

2.2.1 CÁLCULO DO FATOR DE RETENÇÃO

Lisina

Rf = 2,8/16,9

Rf = 0,166

Ácido aspártico

Rf = 4/16,9

Rf = 0,237

Leucina

Rf = 11,9/16,9

Rf = 0,704

Valina

Rf = 8,3/16,9

Rf = 0,491

Ponto 1

...

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