A CROMATOGRAFIA EM PAPEL E CAMADA DELGADA
Por: Lucas Mateus de Souza • 6/1/2018 • Ensaio • 535 Palavras (3 Páginas) • 422 Visualizações
[pic 1]
BRUNA MARTINS
ELOÁ MIRIAN
EDNA JINGA
GEOVANA DIAS
IVANA COSTA
SABRINA ALECSANDRA
CROMATOGRAFIA EM PAPEL E CAMADA DELGADA
LONDRINA – 2017
1 INTRODUÇÃO
Grande parte da pesquisa na química de proteínas envolve a separação e a identificação das proteínas estudadas (CAMPBELL et al., 2015; FARREL et al., 2015). Por meio da cromatografia em papel e camada delgada distinguimos os componentes de uma mistura de aminoácidos observando a migração dos mesmos em papel e camada delgada. Esta é uma técnica analítica de separação de misturas.
A técnica de cromatografia em papel separa os aminoácidos com base em sua polaridade, os componentes da mistura migram devido a interação entre duas fases imiscíveis, a fase móvel (a porção do sistema na qual a mistura a ser separada se move) e a fase estacionária (a substância retarda seletivamente o fluxo da amostra, afetando a separação). Quanto mais polar for o aminoácido, mais fortemente ele será adsorvido no papel, que é uma fase estacionária polar, e se deslocarão mais lentamente pelo papel.
Os aminoácidos são ácidos carboxílicos que possuem uma função anima como podemos ver na figura 2. Uma ligação amida entre a função do ácido carboxílico de um aminoácido e o nitrogênio do grupo amino de outro aminoácido é chamada de ligação peptídica.
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2 RESULTADOS E DISCUSSÕES
2.1 CROMATOGRAFIA EM PAPEL
O deslocamento da fase móvel foi de 17,5 cm e os deslocamentos dos aminoácidos e da amostra estão nas tabelas a seguir.
Tabela 1. Deslocamento dos aminoácidos.
Lisina | Ácido aspártico | Leucina | Valina | |
Deslocamento (cm) | 2 | 3,2 | 13,5 | 8,6 |
Tabela 2. Deslocamento da amostra.
Ponto 1 | Ponto 2 | Ponto 3 | |
Deslocamento (cm) | 2,1 | 8,6 | 13,4 |
2.1.1 CÁLCULO DO FATOR DE RETENÇÃO
Lisina
Rf = 2/17,5
Rf = 0,114
Ácido aspártico
Rf = 3,2/17,5
Rf = 0,183
Leucina
Rf = 13,5/17,5
Rf = 0,771
Valina
Rf = 8,6/17,5
Rf = 0,491
Ponto 1
Rf = 2,1/17,5
Rf = 0,12
Ponto 2
Rf = 8,6/17,5
Rf = 0,491
Ponto 3
Rf = 13,4/17,5
Rf = 0,766
Os valores dos pontos 1 e 3 não são exatamente iguais aos dos padrões, mas chegam a valores bem próximos.
Portanto, pode-se afirmar que os pontos 1, 2 e 3 são lisina, valina e leucina respectivamente.
2.2 CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA
O deslocamento da fase móvel foi de 19,5 cm e os deslocamentos dos aminoácidos e da amostra estão nas tabelas a seguir.
Tabela 3. Deslocamento dos aminoácidos.
Lisina | Ácido aspártico | Leucina | Valina | |
Deslocamento (cm) | 2,8 | 4 | 11,9 | 8,3 |
Tabela 4. Deslocamento da amostra.
Ponto 1 | Ponto 2 | Ponto 3 | |
Deslocamento (cm) | 2,7 | 8,2 | 12,1 |
2.2.1 CÁLCULO DO FATOR DE RETENÇÃO
Lisina
Rf = 2,8/16,9
Rf = 0,166
Ácido aspártico
Rf = 4/16,9
Rf = 0,237
Leucina
Rf = 11,9/16,9
Rf = 0,704
Valina
Rf = 8,3/16,9
Rf = 0,491
Ponto 1
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