A CROMATOGRAFIA EM PAPEL E CAMADA DELGADA

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BRUNA MARTINS

ELOÁ MIRIAN

EDNA JINGA

GEOVANA DIAS

IVANA COSTA

SABRINA ALECSANDRA

CROMATOGRAFIA EM PAPEL E CAMADA DELGADA

LONDRINA – 2017

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1 INTRODUÇÃO

Grande parte da pesquisa na química de proteínas envolve a separação e a identificação das proteínas estudadas (CAMPBELL et al., 2015; FARREL et al., 2015). Por meio da cromatografia em papel e camada delgada distinguimos os componentes de uma mistura de aminoácidos observando a migração dos mesmos em papel e camada delgada. Esta é uma técnica analítica de separação de misturas.  

A técnica de cromatografia em papel separa os aminoácidos com base em sua polaridade, os componentes da mistura migram devido a interação entre duas fases imiscíveis, a fase móvel (a porção do sistema na qual a mistura a ser separada se move) e a fase estacionária (a substância retarda seletivamente o fluxo da amostra, afetando a separação). Quanto mais polar for o aminoácido, mais fortemente ele será adsorvido no papel, que é uma fase estacionária polar, e se deslocarão mais lentamente pelo papel.

Os aminoácidos são ácidos carboxílicos que possuem uma função anima como podemos ver na figura 2. Uma ligação amida entre a função do ácido carboxílico de um aminoácido e o nitrogênio do grupo amino de outro aminoácido é chamada de ligação peptídica.

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2 RESULTADOS E DISCUSSÕES

2.1 CROMATOGRAFIA EM PAPEL

O deslocamento da fase móvel foi de 17,5 cm e os deslocamentos dos aminoácidos e da amostra estão nas tabelas a seguir.

Tabela 1. Deslocamento dos aminoácidos.

	Lisina	Ácido aspártico	Leucina	Valina
Deslocamento (cm)	2	3,2	13,5	8,6

Tabela 2. Deslocamento da amostra.

	Ponto 1	Ponto 2	Ponto 3
Deslocamento (cm)	2,1	8,6	13,4

2.1.1 CÁLCULO DO FATOR DE RETENÇÃO

Lisina

Rf = 2/17,5

Rf = 0,114

Ácido aspártico

Rf = 3,2/17,5

Rf = 0,183

Leucina

Rf = 13,5/17,5

Rf = 0,771

Valina

Rf = 8,6/17,5

Rf = 0,491

Ponto 1

Rf = 2,1/17,5

Rf = 0,12

Ponto 2

Rf = 8,6/17,5

Rf = 0,491

Ponto 3

Rf = 13,4/17,5

Rf = 0,766

Os valores dos pontos 1 e 3 não são exatamente iguais aos dos padrões, mas chegam a valores bem próximos.

Portanto, pode-se afirmar que os pontos 1, 2 e 3 são lisina, valina e leucina respectivamente.

2.2 CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA

O deslocamento da fase móvel foi de 19,5 cm e os deslocamentos dos aminoácidos e da amostra estão nas tabelas a seguir.

Tabela 3. Deslocamento dos aminoácidos.

	Lisina	Ácido aspártico	Leucina	Valina
Deslocamento (cm)	2,8	4	11,9	8,3

Tabela 4. Deslocamento da amostra.

	Ponto 1	Ponto 2	Ponto 3
Deslocamento (cm)	2,7	8,2	12,1

2.2.1 CÁLCULO DO FATOR DE RETENÇÃO

Lisina

Rf = 2,8/16,9

Rf = 0,166

Ácido aspártico

Rf = 4/16,9

Rf = 0,237

Leucina

Rf = 11,9/16,9

Rf = 0,704

Valina

Rf = 8,3/16,9

Rf = 0,491

Ponto 1